基于天然SelU介导机制的s2U-tRNA点击化学标记与成像新策略

《ChemBioChem》：Nature-Inspired Chemical Probes for Labeling tRNAs Containing 2-Thiouridine (s2U)

本研究针对2-硫代尿苷(s2U)修饰tRNA的检测难题，开发了ACT-Flu（叠氮化-点击荧光标记）双步标记技术。通过模拟天然SelU介导的tRNA香叶基化过程，利用设计的新型"可点击"香叶基焦磷酸类似物，实现了特异性s2U-tRNA的荧光标记与活细胞成像，为研究tRNA修饰在细胞进程与疾病中的作用提供了创新工具。

　　

研究人员受天然RNA疏水性异戊烯化修饰的启发，开发了一种创新的化学标记策略用于特异性检测含2-硫代尿苷(2-thiouridine, s²U)的转移RNA(tRNA)。该技术巧妙利用SelU酶介导的tRNA香叶基化天然过程，设计合成了一系列"可点击"(clickable)的香叶基焦磷酸类似物。通过两步法操作——先进行叠氮化修饰再进行点击化学反应连接荧光染料(简称ACT-Flu法)，成功实现了对s²U-tRNA的高效标记。特别值得注意的是，由于人类tRNA的自然s²U34修饰位点不存在异戊烯基团，该方法展现出优异的特异性。该技术已成功应用于活细胞RNA成像领域，为深入研究s²U-tRNA的生物学功能及其在健康与疾病状态下的动态变化提供了强大的生化工具集。