巨细胞病毒感染通过激活MyD88/NF-κB正反馈环路触发同种异体皮肤移植小鼠炎症性肠病的机制研究

本刊推荐：针对器官移植后免疫抑制状态下巨细胞病毒(CMV)感染诱发炎症性肠病(IBD)的机制难题，浙江大学团队通过建立同种异体皮肤移植小鼠模型，发现CMV立即早期蛋白通过激活MyD88/NF-κB信号通路触发肠道炎症级联反应。该研究揭示了CMV感染与IBD发病的新关联，为开发靶向MyD88/NF-κB通路的治疗策略提供了理论依据。

　　

在免疫抑制患者中，巨细胞病毒(CMV)感染常导致严重的并发症，但其与炎症性肠病(IBD)的关联机制尚未阐明。IBD作为一种慢性肠道炎症性疾病，其发病率在工业化国家持续攀升，而CMV在IBD患者肠道中的检出率显著高于健康人群。更令人关注的是，合并CMV感染的IBD患者往往表现出激素抵抗等不良预后。虽然已知核因子κB(NF-κB)信号通路的异常激活是IBD发病的关键因素，且CMV感染可持久激活NF-κB，但二者之间的具体作用机制仍是一个亟待解决的科学问题。

浙江省中医药研究院的Ming-Xian Chen团队在《Virology Journal》发表的研究，创新性地构建了同种异体皮肤移植小鼠模型，通过免疫抑制剂环孢素A(CsA)处理模拟临床移植后免疫抑制状态。研究采用表达绿色荧光蛋白的鼠巨细胞病毒(MCMV)K181-eGFP株及其立即早期启动子缺失突变株(hMIEP-eGFP K181)，结合MyD88基因敲除小鼠，系统揭示了CMV感染通过立即早期蛋白激活MyD88依赖性NF-κB信号通路，进而诱发肠道炎症的分子机制。

关键技术方法包括：建立BALB/c→C57BL/6同种异体皮肤移植模型，使用CsA进行免疫抑制；通过鼻内接种1×10⁵ PFU的MCMV病毒株；采用巢式PCR检测病毒DNA拷贝数；免疫荧光观察病毒定植；ELISA检测血清炎症因子(TNF-α、IL-1β等)水平；Western blot分析MyD88/NF-κB通路蛋白表达；FITC-葡聚糖渗透实验评估肠道屏障功能；HE染色分析结肠病理改变。

研究结果部分，"eGFP K181感染增加同种异体皮肤移植小鼠结肠通透性并促进坏死和炎症细胞浸润"显示：感染eGFP K181的移植小鼠结肠组织中病毒DNA拷贝数和IE1蛋白表达显著升高，伴随体重下降、肠道屏障功能破坏以及明显的结肠坏死和炎症细胞浸润。血清炎症因子TNF-α、IL-1β等水平呈时间依赖性增加，证实CMV感染可诱发系统性炎症反应。

"eGFP K181感染激活同种异体皮肤移植小鼠MyD88/NF-κB信号通路"部分发现：感染组结肠组织中MyD88、TRAF6、TAK1等信号分子及IKKα/β、p65/p52等NF-κB亚基表达上调，同时血清抗鞭毛蛋白IgG和脂多糖(LPS)IgG水平升高，提示TLR配体参与激活MyD88依赖性炎症通路。

"hMIEP-eGFP K181感染抑制同种异体皮肤移植小鼠结肠通透性、坏死和炎症细胞浸润"的实验证实：缺失立即早期启动子的病毒株感染后，病毒复制能力减弱，结肠病理损伤和炎症因子分泌显著减轻，证明CMV立即早期基因在促炎症反应中的关键作用。

"eGFP K181感染通过MyD88依赖性NF-κB激活促进结肠病理改变"的遗传学证据显示：MyD88敲除小鼠感染后病毒载量降低，结肠屏障功能改善，炎症浸润减轻，且NF-κB通路相关蛋白表达受抑，明确MyD88在CMV诱导肠道炎症中的核心地位。

该研究首次阐明CMV感染通过"病毒立即早期蛋白-MyD88-NF-κB"正反馈环路触发IBD的完整机制：CMV立即早期蛋白激活MyD88依赖性NF-κB信号，促进炎症因子释放并破坏肠道屏障；同时活化的NF-κB又增强病毒立即早期启动子活性，形成恶性循环。这一发现不仅解释了移植患者并发CMV肠炎的分子基础，更为开发靶向MyD88/NF-κB通路的干预策略提供了理论依据。特别值得注意的是，立即早期启动子缺失病毒株的减毒效应提示，靶向病毒立即早期基因转录可能是防治CMV相关IBD的新方向。该研究将病毒学与肠道免疫研究相结合，为理解感染因素在IBD发病中的作用提供了创新视角。