静脉注射型溶瘤病毒RadioOnco的定制化开发及其在增强放疗效果中的多重机制研究

《Cell Reports Medicine》：Tailoring an intravenously injectable oncolytic virus for augmenting radiotherapy

本文创新性开发了经静脉注射的溶瘤腺病毒（AD）制剂RadioOnco（AD@PSSP），通过多功能聚乙烯亚胺-硒-聚乙二醇（PSSP）修饰实现四大突破：1）ROS响应性PEG壳层脱落实现肿瘤靶向递送；2）暴露的PEI通过静电作用增强病毒感染效率；3）抑制CHEK1-CDK1通路增强放疗敏感性；4）捕获放疗释放抗原形成原位疫苗。动物实验证实该策略可克服放疗抵抗、靶向远端转移灶并建立长期免疫记忆，为临床转化提供新范式。

　　ROS响应型病毒载体的创新设计
研究团队开发了基于溶瘤腺病毒（AD）的新型制剂RadioOnco（AD@PSSP），其表面修饰的多功能聚合物PSSP包含三个关键组分：聚乙烯亚胺（PEI）增强细胞吸附，硒-硒（Se-Se）键响应放疗产生的活性氧（ROS），聚乙二醇（PEG）延长循环半衰期。透射电镜显示修饰后病毒粒径从100.4 nm增至134.8 nm，体外实验证实20 kDa PEG能最优平衡抗体中和抵抗（提升3.2倍）与感染效率（TC-1细胞感染率68%）。

放疗触发的精准激活机制
当2 Gy剂量放疗时，肿瘤内ROS水平在12小时达峰（DCF荧光强度345.8），触发Se-Se键断裂使PEG脱落。双荧光标记实验（Cy₃/BHQ₂）证实该过程具有肿瘤特异性，肝脏荧光强度仅为肿瘤的17%。释放的PEI使病毒zeta电位从-12.4 mV转为+28.6 mV，通过静电作用使TC-1细胞感染效率提升2.3倍（p<0.0001）。

DNA损伤修复的双重干预
蛋白质组学（IPROX数据库）揭示AD-PEI可下调9个DNA修复相关蛋白，其中检查点激酶1（CHEK1）及其下游细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）表达量分别降低72%和65%。克隆形成实验显示该组合使放疗半数致死剂量（D₀）从3.2 Gy降至1.58 Gy，放射增敏比达2.03。

免疫激活的级联反应
PEI可高效捕获放疗释放的肿瘤衍生蛋白（TDPs），流式细胞术显示其使树突状细胞（DCs）的抗原提呈效率提升4.8倍。在TC-1荷瘤模型中，AD@PSSP+RT组引流淋巴结内CD8⁺T细胞占比达38.7%，显著高于单药组（12.4%，p<0.001），血清IFN-γ水平升高至286 pg/mL。

临床转化潜力验证
在放疗抵抗模型中，AD@PSSP使肿瘤抑制率从RT单药的21%提升至89%（p<0.0001）。肝癌PDX模型显示联合治疗组肿瘤体积较对照组减少78%，且未加重放疗相关的白细胞减少（WBC计数维持4.2×10⁹/L）和肠道损伤。该研究为静脉注射型溶瘤病毒联合放疗提供了可转化的技术方案。