TRIM44：糖尿病视网膜病变治疗的新希望 ——KLF9 调控机制下的潜在靶点研究

《Journal of Translational Medicine》：Aberrant expression of TRIM44, transcriptionally regulated by KLF9, contributes to the process of diabetic retinopathy

为解决糖尿病视网膜病变（DR）治疗难题，研究人员开展了 TRIM44 在 DR 中作用及机制的研究。结果发现，TRIM44 在糖尿病大鼠视网膜和高糖诱导的细胞中高表达，敲低 TRIM44 可改善 DR 病理变化。这为 DR 治疗提供新方向。

　　糖尿病视网膜病变（Diabetic retinopathy，DR）作为糖尿病最常见的微血管并发症，堪称工作年龄成年人失明和视力障碍的 “罪魁祸首”。当前，抗血管内皮生长因子 A（VEGFA）疗法虽为主要治疗手段，但频繁的玻璃体内注射让许多患者苦不堪言，而且部分患者疗效欠佳，这使得探寻更有效的治疗方法迫在眉睫。

吉林大学第二医院的研究人员勇挑重担，聚焦 TRIM44 在 DR 中的作用及机制展开研究。他们发现，TRIM44 在糖尿病大鼠视网膜组织和高糖（HG）诱导的大鼠视网膜微血管内皮细胞（RMECs）中高表达。敲低 TRIM44 能显著改善 DR 大鼠的病理改变，降低视网膜组织中 isolectin-B4 和 VEGFA 的表达，减少无细胞毛细血管数量，还可抑制 HG 诱导的 RMECs 的细胞活力、增殖、迁移、侵袭和血管生成。研究还证实，Krüppel 样因子 9（KLF9）可转录激活 TRIM44，敲低 TRIM44 会影响 KLF9 介导的细胞功能。此外，通过蛋白质组学分析筛选出了 TRIM44 下游的差异表达蛋白（DEPs），并对其进行了功能富集分析。

此项研究意义非凡，为糖尿病视网膜病变的治疗开辟了新方向，有望基于 TRIM44 开发出更有效的治疗策略。该研究成果发表于《Journal of Translational Medicine》。

在研究过程中，研究人员运用了多种关键技术方法。动物实验方面，构建了糖尿病大鼠模型，通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病；细胞实验中，培养 RMECs 并进行高糖处理构建细胞模型；分子生物学技术上，采用定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）检测基因表达，蛋白质免疫印迹法（WB）检测蛋白表达，双荧光素酶报告基因实验验证转录调控。

研究结果具体如下：

• TRIM44 在糖尿病大鼠视网膜广泛表达：与正常大鼠相比，糖尿病大鼠血糖升高、体重下降，视网膜组织中 TRIM44 的 mRNA 和蛋白水平显著上升，视网膜神经节细胞层（GCL）中 TRIM44 阳性的视网膜神经节细胞（RGCs）数量增加。
• 敲低 TRIM44 减轻糖尿病大鼠视网膜病变：向糖尿病大鼠玻璃体内注射沉默 TRIM44 的慢病毒后，发现 isolectin-B4 表达增强受到抑制，视网膜血管生成受损得到改善，视网膜 GCL 肿胀、内核层（INL）和外核层（ONL）变薄等形态学变化也显著缓解，无细胞毛细血管数量减少，VEGFA 表达下降。
• TRIM44 在 HG 诱导的 RMECs 广泛表达：HG 处理 RMECs 后，细胞活力随处理时间增加而上升，同时 TRIM44 在 HG 条件下的 RMECs 中显著表达，且主要位于细胞质。
• 敲低 TRIM44 减轻 HG 诱导的细胞迁移和侵袭：转染沉默 TRIM44 的慢病毒后，HG 处理的 RMECs 细胞活力、增殖、迁移和侵袭能力均受到显著抑制。
• 敲低 TRIM44 减轻 HG 诱导的血管形成：HG 处理的 RMECs 管形成能力增强，敲低 TRIM44 可抑制这一现象，且 VEGFA 表达下降。
• TRIM44 由 KLF9 转录上调：HG 条件下 KLF9 高表达，过表达 KLF9 可上调 TRIM44 表达，双荧光素酶报告基因实验表明 KLF9 可激活 TRIM44 启动子，增强其转录活性。
• TRIM44 敲低影响 KLF9 介导的 HG 诱导 RMECs 细胞功能：在 HG 诱导的 RMECs 中，过表达 KLF9 增强的细胞活力、迁移和侵袭能力可被 TRIM44 敲低所抑制。
• 筛选 TRIM44 下游靶蛋白：蛋白质组学分析共筛选出 38 个下调蛋白和 64 个上调蛋白，根据真核直系同源组（KOG）注释，这些蛋白功能分布在 19 个类别中，其中翻译后修饰、蛋白质周转和分子伴侣类别中的蛋白数量最多。
• DEPs 的 GO 和 KEGG 富集分析：基因本体（GO）富集分析显示，上调蛋白主要富集在神经节苷脂 GM1 结合、激肽原结合等分子功能；下调蛋白主要富集在蛋白质 - 谷氨酸 O - 甲基转移酶活性、岩藻糖激酶活性等分子功能。京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析表明，这些蛋白参与药物代谢、MAPK 信号通路等多种过程。

研究结论和讨论部分指出，TRIM44 在糖尿病视网膜病变中扮演着关键角色，其高表达与视网膜病变密切相关。敲低 TRIM44 可通过下调 VEGFA 表达抑制血管生成，延缓 DR 进展。虽然该研究存在一定局限性，如动物模型与人类视网膜微血管网络存在差异、细胞模型缺乏体内环境复杂性等，但为后续研究奠定了坚实基础，未来有望进一步探索 TRIM44 在其他眼部血管疾病中的作用，开发出更有效的治疗方法，为广大糖尿病视网膜病变患者带来新的希望。