METTL16介导的miR-146b-5p m6A修饰通过激活PI3K/AKT信号通路促进非小细胞肺癌奥希替尼耐药

本研究针对非小细胞肺癌(NSCLC)奥希替尼耐药难题，揭示了METTL16通过m6A修饰调控miR-146b-5p稳定性，进而激活PI3K/AKT信号通路的关键机制。研究人员通过生物信息学分析、细胞模型构建和分子生物学实验，发现靶向METTL16/miR-146b-5p轴可显著增强肿瘤细胞对奥希替尼的敏感性，为克服EGFR-TKI耐药提供了新靶点和治疗策略。

　　肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占比高达85%。尽管第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂奥希替尼(AZD-9291)显著改善了EGFR突变型NSCLC患者的预后，但获得性耐药问题日益突出，中位无进展生存期仅9-14个月。耐药机制的复杂性和分子多样性使得寻找新型治疗靶点成为当务之急。上海交通大学医学院附属第六人民医院的研究团队在《BMC Cancer》发表的研究，首次揭示了RNA甲基化修饰与microRNA调控网络在奥希替尼耐药中的关键作用。

研究采用TCGA和GEO数据库分析、细胞功能实验和分子机制研究相结合的策略。通过构建奥希替尼耐药细胞模型(A549-R和HCC827-R)，利用CCK-8、克隆形成实验和IC₅₀测定评估细胞增殖和耐药性；采用MeRIP-qPCR和RNA pull-down分析m⁶A修饰；通过双荧光素酶报告基因验证miRNA-mRNA互作；结合PI3K/AKT通路抑制剂LY294002和激动剂SC79进行功能回复实验。

结果部分显示，miR-146b-5p在NSCLC组织和耐药细胞中显著高表达，与不良预后相关。功能实验证实miR-146b-5p模拟物可促进细胞增殖并使IC₅₀值升高20倍，而抑制剂则逆转耐药表型。机制研究发现miR-146b-5p直接靶向抑癌基因PTEN的3'UTR，激活PI3K/AKT信号通路。更深入的研究揭示甲基转移酶METTL16特异性催化miR-146b-5p的m⁶A修饰，延长其半衰期。METTL16敲除使耐药细胞对奥希替尼的敏感性恢复，且这种效应可通过PI3K/AKT激动剂部分逆转。

讨论部分强调，该研究首次阐明METTL16-miR-146b-5p-PTEN轴在奥希替尼耐药中的核心作用，提出RNA表观遗传修饰调控microRNA稳定性的新机制。虽然存在临床样本量有限等局限性，但研究为克服TKI耐药提供了双重靶向策略：既可抑制METTL16的甲基化活性，又可阻断下游PI3K/AKT信号传导。这种联合干预策略在体外实验中显示出显著协同效应，为未来临床转化研究奠定理论基础。