三阴性乳腺癌新辅助免疫检查点阻断治疗后 NK 细胞表型及细胞因子研究：揭示预后相关关键亚群

《Breast Cancer Research》：Phenotypes and cytokines of NK cells in triple-negative breast cancer resistant to checkpoint blockade immunotherapy

三阴性乳腺癌（TNBC）预后差，新辅助免疫检查点抑制剂治疗（NATI）后仍有残留肿瘤细胞。研究人员开展 TNBC 患者 NATI 后 NK 细胞表型和细胞因子研究，发现分泌 IL-10 的 SELL+肿瘤浸润 NK 细胞亚群与不良预后相关，为 TNBC 免疫治疗提供新方向。

　　三阴性乳腺癌（TNBC），这一在乳腺癌领域中极为棘手的存在，缺乏 HER2、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达，具有高转移风险，严重威胁着患者的生命健康，在所有浸润性乳腺癌中占比 10 - 15%。新辅助免疫检查点抑制剂治疗（NATI）虽能提高 TNBC 患者的病理完全缓解率（pCR）、延长生存期，但不少患者无法达到 pCR 终点，治疗后残留的肿瘤细胞具有转移和复发的潜在风险，严重影响患者的长期生存。这些残留癌细胞不仅对 NATI 存在内在抵抗，还会利用肿瘤微环境逃避细胞毒性作用。目前，对于早期 TNBC 抵抗 NATI 的微环境了解有限，尤其是高残留癌负担（RCB）患者。而 NK 细胞作为抗肿瘤免疫的关键效应细胞，在 NATI 后的免疫微环境中的组成和功能尚不清楚。在此背景下，为了深入探究 TNBC 患者 NATI 后免疫微环境中 NK 细胞的奥秘，来自汕头大学医学院附属肿瘤医院、解放军总医院海南医院、福建医科大学附属第一医院等多家国内研究机构的研究人员开展了相关研究。该研究成果发表在《Breast Cancer Research》上，为 TNBC 的免疫治疗提供了新的思路和方向。
研究人员主要运用了单细胞膜蛋白质组学和单细胞分泌蛋白质组学技术，对来自 28 例 TNBC 患者的肿瘤组织、癌旁组织及外周血中的 CD56⁺（NCAM1⁺）NK 细胞进行研究，并在 15 例患者的独立队列中进行验证。
患者样本特征和 NK 细胞聚类方面：研究人员从 28 例 TNBC 患者术后样本中获取 NK 细胞，平均年龄 39.29 ± 5.94 岁，多数患者术前接受 PD - 1 阻滞剂治疗。通过单细胞膜蛋白质组学分析，共获得 54655 个 NK 细胞，经 Seurat 软件无偏聚类为 11 个簇。其中，簇 2 和 5 主要代表肿瘤浸润 NK（TINK）细胞，簇 9 和 10 主要来自癌旁组织，簇 3 主要来自外周血，初步表明不同组织来源的 NK 细胞存在差异。
癌症特异性 NK 细胞的免疫表型方面：TINK 细胞中，簇 2 的 FcγRIII（CD16）、NCR2、NKp30 等功能相关蛋白低表达，且缺乏重要免疫调节因子，高表达免疫抑制相关蛋白，呈现功能缺陷的免疫抑制表型；簇 5 则高表达 TNFRSF7（CD27）等激活相关标记，表现为免疫激活状态。癌旁组织的簇 9 和 10 高表达免疫抑制标记，功能受体缺乏。外周血的簇 3 具有免疫抑制和激活的混合功能，但也存在功能缺陷。
TINK 细胞亚群分泌细胞因子差异方面：鉴于 SELL⁺和 TNFRSF7⁺的 TINK 细胞免疫表型存在矛盾，研究人员对这两个亚群进行单细胞分泌蛋白质组学分析。结果显示，SELL⁺NK 细胞的分泌产物主要包含 IL - 4、IL - 10 和 TGFβ1 等免疫抑制细胞因子，而 TNFRSF7⁺NK 细胞的分泌产物中 IL - 7 等免疫激活细胞因子水平较高，还有部分细胞能共分泌多种效应细胞因子。
TINK 细胞与患者生存预后的关系方面：通过对 28 例患者 18 个月的随访，发现单细胞膜蛋白质组学中簇 2 的比例与无进展生存期（PFS）相关，较低的簇 2 比例与更好的 PFS 相关；单细胞分泌蛋白质组学中，分泌 IL - 10 的簇 2 比例也与 PFS 预后相关，较低的比例预示着更好的 PFS。这一结果在 15 例患者的验证队列中得到进一步证实。
研究结论表明，研究人员通过单细胞蛋白质组学实验，发现了肿瘤浸润的分泌 IL - 10 的 SELL⁺NK 细胞亚群，该亚群在肿瘤微环境中发挥免疫抑制作用，与 TNBC 患者不良生存预后相关。这一发现验证了先前关于细胞毒性细胞功能缺陷和抑制性免疫环境影响免疫治疗结果的假设，为 TNBC 的免疫治疗提供了潜在的细胞靶点。然而，研究也存在局限性，如患者数量较少、NK 细胞分离困难、检测的蛋白质和细胞因子有限等。未来的研究可以针对这些不足展开，进一步探索 TNBC 免疫治疗的新策略，改善患者的预后。