RNF2通过TRAF2-NF-κB信号轴诱导髓系抑制细胞趋化并促进肝癌进展的机制研究

《Cancer Immunology, Immunotherapy》：RNF2 induces myeloid-derived suppressor cells chemotaxis and promotes hepatocellular carcinoma progression through the TRAF2-NF-κB signaling axis

肝癌免疫治疗耐药机制亟待突破。安徽医科大学第一附属医院等团队发现RNF2通过介导TRAF2的K63泛素化激活NF-κB信号，促进CXCL1介导的MDSCs募集，抑制CD8+T细胞功能。该研究揭示RNF2-TRAF2-NF-κB轴是肝癌免疫逃逸的关键通路，为联合靶向RNF2与PD-1阻断疗法提供新策略。

　　

肝癌作为我国高发恶性肿瘤，其免疫逃逸机制一直是研究难点。尽管PD-1抑制剂等免疫检查点疗法取得突破，但多数患者仍面临原发或继发耐药。近年研究发现，髓系抑制细胞(MDSCs)在肿瘤免疫抑制微环境形成中扮演关键角色，但其在肝癌中的调控机制尚不明确。与此同时，RING finger蛋白家族成员RNF2虽在多种癌症中被证实促癌，但其免疫调节功能仍属未知。

为破解这一科学难题，安徽医科大学第一附属医院感染病科梁曼曼、杨江华团队联合皖南医学院弋矶山医院研究人员，通过临床样本分析、分子互作验证和动物模型等系统研究，首次揭示RNF2通过TRAF2-NF-κB-CXCL1信号轴驱动MDSCs募集的新机制。该成果发表于《Cancer Immunology, Immunotherapy》，为肝癌免疫联合治疗提供新靶点。

研究采用多组学技术联用的策略：通过TIMER2.0数据库分析90例HCC患者组织芯片的免疫浸润特征；运用免疫共沉淀(Co-IP)和邻近连接技术(PLA)验证RNF2-TRAF2相互作用；建立RNF2敲除的Hepa1-6原位肝癌模型，采用流式细胞术分析免疫细胞亚群；通过双荧光素酶报告基因和ELISA检测NF-κB活性及CXCL1分泌；最后在PD-1治疗模型中评估RNF2敲除的协同效应。

临床关联分析显示，RNF2表达与肝癌不良预后显著相关。TIMER2.0分析揭示RNF2高表达肿瘤中CD33⁺MDSCs浸润增加，且与患者生存期缩短相关。为验证这一现象，研究者构建RNF2敲除的肝癌细胞系，发现原位移植瘤体积缩小50%以上。流式检测显示RNF2缺失使MDSCs比例从32.4%降至14.7%，同时CD8⁺T细胞浸润增加2.3倍。免疫组化进一步证实MDSCs标志物S100A8/A9表达显著降低。

分子机制研究发现，RNF2通过其RING结构域与TRAF2直接结合，催化TRAF2第63位赖氨酸(K63)泛素化修饰。这种修饰促进IKK复合体激活，导致IκBα磷酸化降解，从而增强NF-κB信号通路的持续活化。值得注意的是，RNF2缺失使NF-κB报告基因活性降低67%，核内p65水平下降42%。下游分析显示，RNF2通过NF-κB上调CXCL1表达，其mRNA水平在敲除组降低3.1倍，培养基中CXCL1蛋白减少68%。Transwell实验证实RNF2敲除条件培养基使MDSCs迁移减少61%，而添加重组CXCL1可逆转此效应。

治疗应用方面，RNF2敲除联合抗PD-1治疗使小鼠肿瘤完全消退率从20%提升至80%。流式分析显示联合组肿瘤内CD8⁺IFN-γ⁺效应T细胞增加4.2倍，MDSCs降至对照组的23%。体外共培养实验证实RNF2敲除来源的MDSCs对T细胞增殖抑制能力减弱34%。

该研究首次阐明RNF2-TRAF2-NF-κB-CXCL1轴在肝癌免疫逃逸中的核心作用：肿瘤细胞通过RNF2介导的TRAF2 K63泛素化持续激活NF-κB，促进CXCL1分泌招募MDSCs，进而抑制T细胞功能。这一发现不仅解释了肝癌微环境中免疫细胞失衡的分子基础，更提出了靶向RNF2增强PD-1疗效的新策略。特别值得注意的是，RNF2调控的MDSCs亚群以PMN-MDSCs为主，这与肝癌特有的炎症微环境高度契合。研究同时揭示TRAF2 K63泛素化作为NF-κB调控"开关"的精确机制，为开发特异性抑制剂提供结构基础。

未来研究需进一步明确RNF2在不同肝癌分子分型中的表达特征，并探索小分子抑制剂与免疫治疗的协同方案。临床转化方面，可考虑将RNF2表达水平作为PD-1治疗疗效预测标志物。该研究为破解肝癌免疫治疗耐药难题提供了理论依据和干预靶点，具有重要的临床转化价值。