低剂量 IL-2 免疫疗法：对抗糖尿病视网膜病变血管损伤的新希望

《Diabetologia》：Immunotherapy with low-dose IL-2 attenuates vascular injury in mice with diabetic and neovascular retinopathy by restoring the balance between Foxp3+ Tregs and CD8+ T cells

为探究低剂量 IL-2 能否通过增加调节性 T 细胞（Tregs）数量和功能、减少 CD8+T 细胞，来减轻糖尿病和氧诱导性视网膜病变小鼠的视网膜炎症和血管损伤，墨尔本大学研究人员开展相关研究，发现低剂量 IL-2 可缓解病变，为治疗糖尿病视网膜病变提供新方向。

　　糖尿病视网膜病变是工作年龄人群失明和视力受损的主要原因。这一病症的关键在于视网膜微血管受损，随着病情发展，微血管会失去周细胞和内皮细胞，形成无细胞毛细血管，导致组织缺血、血 - 视网膜屏障破坏和新生血管形成。目前，抑制血管内皮生长因子（VEGF）的药物虽在治疗中发挥了重要作用，但存在诸多局限，如仅对部分已有视力损失的患者有效，无法阻止病情进展，且需要反复眼内注射，很多患者反应不佳。

同时，炎症和免疫系统在糖尿病视网膜病变的发展中起着重要作用。其中，调节性 T 细胞（Tregs）表达的 Forkhead box protein P3（Foxp3）能抑制炎症，而 CD8⁺T 细胞会释放炎症和细胞毒性因子，损伤视网膜血管。白细胞介素 - 2（IL-2）与 T 细胞和免疫细胞上的 IL-2 受体结合，可影响 Tregs 和效应细胞的增殖与分化。低剂量 IL-2 能增加 Tregs 数量和功能，减少效应免疫细胞，且耐受性良好，在多种疾病的临床研究中展现出潜力，但在糖尿病视网膜病变中的作用尚未明确。

为了深入探究低剂量 IL-2 在糖尿病视网膜病变中的作用，墨尔本大学的研究人员展开了一系列研究。他们利用链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠模型和氧诱导性视网膜病变（OIR）小鼠模型，通过腹腔注射低剂量 IL-2（25,000 U）或无菌水（对照组）进行干预。研究结果表明，低剂量 IL-2 在糖尿病和 OIR 小鼠模型中展现出了积极的治疗效果。

在 Tregs 和 CD8⁺T 细胞方面，低剂量 IL-2 显著增加了血液和脾脏中 CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Tregs 的数量，增强了 Tregs 的功能，提高了细胞毒性 T 淋巴细胞相关蛋白 4（CTLA4）、程序性细胞死亡蛋白 1（PD1）和含免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域的 T 细胞免疫受体（TIGIT）的表达水平，同时增加了 Tregs 与 CD8⁺T 细胞的比例。在视网膜中，低剂量 IL-2 使 Foxp3⁺Tregs 数量显著增加，CD8⁺T 细胞数量明显减少。

在炎症因子方面，低剂量 IL-2 降低了视网膜中细胞间粘附蛋白 1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子（TNF）和趋化因子干扰素 γ 诱导蛋白 10（IP-10）等炎症因子的水平。

在血管病变方面，低剂量 IL-2 有效减轻了视网膜血管病变，显著减少了无细胞毛细血管的数量、新生血管化程度和血管渗漏，降低了血管内皮生长因子（VEGF）的表达。

研究人员为开展此项研究，运用了多种技术方法。在动物模型构建上，通过对小鼠进行氧诱导和链脲佐菌素注射，分别建立了氧诱导性视网膜病变和糖尿病模型。在细胞分析方面，采用流式细胞术检测血液、淋巴结和脾脏中的免疫细胞；利用共聚焦显微镜对视网膜中的 Foxp3^RFP+和 CD8^GFP+T 细胞进行定量分析。在病变评估上，通过视网膜平铺片染色和成像来量化新生血管化和血管闭塞，使用 ELISA 测定血管渗漏和 VEGF 水平，采用实时 PCR 检测相关基因的表达。

具体研究结果如下：

1. 对 OIR 小鼠的影响：低剂量 IL-2 使 OIR 小鼠血液中 Tregs 数量增加至正常水平，增强了脾脏中 Tregs 的功能，提高了 Treg 与 CD8⁺T 细胞的比例，减少了视网膜中 CD8⁺T 细胞数量，降低了 ICAM-1、TNF 和 IP-10 的表达，有效减轻了视网膜血管病变，包括减少新生血管化、血管闭塞和血管渗漏，降低 VEGF 蛋白水平。
2. 对糖尿病小鼠的影响：低剂量 IL-2 增加了糖尿病小鼠血液和脾脏中 Tregs 的数量，增强了 Tregs 的功能，提高了 Treg 与 CD8⁺T 细胞的比例，减少了视网膜中 CD8⁺T 细胞数量，降低了 ICAM-1、TNF 和 IP-10 的 mRNA 水平，减少了无细胞毛细血管的数量、血管渗漏和 VEGF 的表达。

综合研究结果和讨论部分可知，低剂量 IL-2 免疫疗法在糖尿病视网膜病变的治疗中展现出了巨大的潜力。它通过调节 Tregs 和 CD8⁺T 细胞的平衡，有效减轻了视网膜炎症和血管损伤，为糖尿病视网膜病变的治疗提供了新的思路和方法。不过，目前仍有一些问题有待进一步研究，如低剂量 IL-2 对血 - 视网膜屏障及其紧密连接的直接保护作用，以及其对眼内 IL-2 水平的影响等。但总体而言，这项研究为糖尿病视网膜病变的治疗开辟了新方向，有望为患者带来新的希望。