PLZF? CD4? T 细胞经 IL-15/IL-15Rα 信号通路调控哮喘免疫耐受新机制

为探究 CD4?组织驻留记忆 T（TRM）细胞在哮喘免疫耐受中的作用及 PLZF 的调控机制，研究发现其经 IL-15/IL-15Rα 信号影响哮喘，为治疗提供新方向。

　　过敏性哮喘是一种常见的慢性气道疾病，以慢性气道炎症、支气管高反应性、可逆性气流受限和气道重塑为主要特征。它严重影响患者的生活质量，甚至可能导致死亡，尤其是在儿童和年轻人中。目前，虽然舌下免疫疗法等被探索用于治疗哮喘，但效果并不理想，重建口服耐受或许是潜在的治疗策略。

在免疫系统中，免疫耐受的失衡是过敏性哮喘的关键致病因素。不同类型的细胞参与维持免疫耐受，其中 CD4? CD44?记忆 T 细胞与免疫耐受关系密切，而组织驻留记忆 T（TRM）细胞又是 CD4? CD44?记忆 T 细胞的重要亚型。不过，TRM 细胞在哮喘免疫耐受中的作用以及其受调控的机制尚不清楚。此外，早幼粒细胞白血病锌指蛋白（PLZF）作为一种关键的转录因子，虽参与哮喘耐受调节，但它对 CD4? TRM 细胞的调控作用也不明确。基于这些问题，来自复旦大学附属上海市第五人民医院等机构的研究人员展开了深入研究，相关成果发表在《Cell Communication and Signaling》上。

为了探究 CD4? TRM 细胞在哮喘免疫耐受中的作用以及 PLZF 对其的调控机制，研究人员开展了一系列实验。实验用到的主要技术方法包括：构建哮喘和口服耐受小鼠模型，模拟疾病发生发展过程；运用流式细胞术，对不同细胞亚群进行分析检测；通过基因敲除技术，研究特定基因在细胞中的功能；利用免疫荧光技术，观察细胞和分子在组织中的定位和表达。

研究结果如下：

1. CD4? CD44?记忆 T 细胞与哮喘的关系：研究人员成功建立了哮喘和口服耐受小鼠模型，经检测发现，与对照组和口服耐受组相比，哮喘组小鼠肺部的 CD4? CD44?记忆 T 细胞显著富集，且 CD4? TRM 和 CD4?效应记忆 T（TEM）细胞在哮喘组占比较高。同时，随着时间推移，哮喘记忆组小鼠的过敏表型减轻，CD4? CD44? T 细胞比例下降，再次刺激后，过敏表型和 CD4? CD44? T 细胞比例又会增加，这表明 CD4? CD44?记忆 T 细胞比例与哮喘症状呈正相关。
2. CD4? TRM 细胞的作用：进一步研究发现，哮喘组和哮喘记忆组小鼠肺部 CD45? CD4? TRM 细胞显著富集，且 TRM 细胞能产生更多的 2 型（T2）细胞因子，如 IL-4、IL-5 和 IL-13。通过抑制外周淋巴循环收集相对纯的 TRM 细胞，发现阻断外周淋巴循环后哮喘表型未改善，T2 细胞因子水平仍较高，这说明 CD4? TRM 细胞是导致哮喘记忆 T 细胞比例和 T2 细胞因子水平变化的关键因素。此外，将 CD4? TRM 细胞过继转移到口服耐受模型小鼠中，会导致肺部免疫细胞浸润增加，T2 细胞因子表达上升，破坏免疫耐受，证明 CD4? TRM 细胞在哮喘免疫耐受破坏中起重要作用。
3. PLZF 对 CD4? TRM 细胞的调控：由于 PLZF 在调节记忆表型中起关键作用，研究人员构建了 PLZF 条件性敲除小鼠模型。结果显示，敲除 PLZF 后，哮喘小鼠的炎症明显减轻，T2 细胞因子分泌减少，CD4? CD44? T 细胞和 CD4? TRM 细胞比例下降，这表明 PLZF 在 CD4? T 细胞中对 CD4? TRM 细胞的分化起重要调控作用。
4. PLZF 调控 CD4? TRM 细胞的信号通路：研究发现，多种信号通路参与调节 CD4? TRM 细胞分化，其中 IL-15/IL-15Rα 信号通路与 PLZF 关系密切。野生型小鼠哮喘组中 IL-15Rα 的基因和蛋白表达更高，使用 IL-15Rα 激动剂处理后，敲除 PLZF 的哮喘小鼠气道炎症加重，T2 细胞因子分泌增加，CD4? CD44? T 细胞和 CD4? TRM 细胞比例上升。体外实验也证实，IL-15 能促进野生型小鼠 CD4? T 细胞分化为 CD4? TRM 细胞，而敲除 PLZF 后这一作用减弱。这表明 PLZF 通过 IL-15/IL-15Rα 信号通路促进 CD4? TRM 细胞分化。

研究结论和讨论部分指出，该研究明确了 CD4? TRM 细胞在哮喘免疫耐受破坏中的关键作用，以及转录因子 PLZF 通过 IL-15/IL-15Rα 信号通路对 CD4? TRM 细胞分化的调控机制。这一发现为哮喘治疗提供了新的潜在靶点，靶向 PLZF 或 IL-15/IL-15Rα 通路有望成为治疗哮喘的有效策略。不过，研究也存在一定局限性，如使用了两种不同品系的小鼠，可能会因免疫特性差异影响结果；且未探索针对 PLZF 的治疗药物，未来还需进一步研究。但总体而言，该研究为深入理解哮喘发病机制和开发新的治疗方法提供了重要依据。