一种快速有效的糖肽富集和糖基化分析的新策略

复旦大学的研究人员开发了一种创新的糖肽富集策略，为全面分析糖基化类型提供了一种快速有效的工具，包括N-糖基化、O-GlcNA酰化和粘蛋白O-糖基化。这种有效的方法减少了样品输入，简化了工作流程，为研究糖基化在生物学和疾病中的作用提供了有力的工具。

　　

蛋白糖基化是调节多种细胞功能的基本生物学过程，但由于糖蛋白的复杂性和低丰度，其研究一直受到阻碍。在《National Science Review》上发表的一项开创性研究中，复旦大学的科学家开发了一种基于化学连接的糖肽富集策略，称为HG-TCs。该方法使用先进的固相材料和生物正交化学同时识别多种糖基化类型，包括N-糖苷，O-GlcNAc位点，O-GalNAc位点以及N-聚糖。这种HG-TCs策略能够通过叠氮-炔环加成反应富集糖肽，并通过胰蛋白酶裂解释放糖肽。这种单管工作流程最大限度地减少了样品损失，同时保持了高再现性。

该方法提供了一个高效的工作流程，具有出色的可扩展性，在单个实验中使用最小的样品量，在HeLa细胞中识别900多个O-GlcNAc位点和800个N-糖位点。该团队指出：“即使在技术复制之间，保证相同的结果仍然具有挑战性。因此，在综合分析中，单独绘制多个糖基化可能会引入操作和技术变化，导致数据不一致，特别是对于某些动态和复杂的生物模型或系统。”因此，“HG-TCs非常有助于研究高度动态和复杂的碳水化合物系统，不仅可以绘制多个糖基化的图谱，还可以同时监测多个糖基化的变化。”

研究小组还将这一策略应用于氧化应激下的HeLa细胞样本分析。他们揭示了细胞核和细胞质之间不同的空间糖基化模式，为糖基化在细胞反应中的动态作用提供了有价值的见解。本研究为糖蛋白组学研究提供了一个强大的工具，有助于理解糖基化在细胞信号传导和疾病机制中的动态作用。对于糖蛋白组学的研究人员来说，这种方法代表了一个重大的飞跃，简化了复杂的工作流程，同时保持了高数据质量。这一发现对于研究癌症和其他疾病的糖基化变化尤为重要。