SpectraPlex 3D多重标记成像：将空间生物学纳入研究，拓展研究领域

SpectraPlex是今年10月德国徕卡显微系统公司为STELLARIS共聚焦平台最新发布的突破性创新功能，能够在亚细胞级的高空间分辨率下，实现一次性分辨高达15重荧光标记的样本成像。

SpectraPlex是今年10月德国徕卡显微系统公司（Leica Microsystems）为STELLARIS共聚焦平台最新发布的突破性创新功能，能够在亚细胞级的高空间分辨率下，实现一次性分辨高达15重荧光标记的样本成像。

通过集成的人工智能算法将组织样本和细胞内结构的复杂细节与各种蛋白靶标分布模式和对应的空间信息整合分析，以探索各种相互作用，拓展组织样本分析的深度和广度，特别适合复杂疾病病理的深入研究。SpectraPlex包含一套专门用于高度多重成像方法的工具，共聚焦功能可获得整个z轴范围内的高分辨率3D数据，便于彻底探索各种标记物的空间分布模式。

研究组织发育、病变组织的细胞变化、表征肿瘤微环境和肿瘤细胞之间复杂的相互作用，需要在三维空间背景下识别特定细胞类型、各种特定细胞标记的表达，以及观察细胞表型变化，进而探索各种蛋白质靶标之间的时空关系以及对各种细胞表型的影响。

荧光成像研究需要区分和定位多种标记物——常规方法包括顺序染色/成像/脱色的多轮重复（每轮一般多至4个标记物），然后配准图像并重新定位样品。虽然从理论上讲可以通过一遍又一遍地重复来对无限数量的标记进行成像，但在实践中重复的染色/脱色潜在有改变样品中部分抗原特性的风险；标记结果往往要等最后一轮染色成像加上多图像配准之后可见，如果出现意外或新的情况，不能返回感兴趣区域更改成像参数进一步探索——因为样本不再以相同的方式存在。

多图像配准需要在所有轮次成像中都有一个共同的基准标记——广泛使用的策略是使用 DAPI 染色作为锚点，并在每轮染色时牺牲一个成像通道来进行核染色。另外，由于样本重新定位和重复处理触发的变形使得回溯检索带有3D背景的信息变得不太可行。

SpectraPlex一次成像 跨尺度获取3D多重标记数据

SpectraPlex先进的光谱拆分算法能够超越传统多色成像的极限。一次性分辨超过15种荧光基团，一次性完成样品的多重标记和成像，不止简化工作量和复杂性，也无需担心切片反复脱色损坏样本的抗原完整性、确保样本可用于重复评估，可对成像结果中感兴趣区域再调整成像策略深入探索，捕捉从细胞内结构到组织样本的复杂细节，融合表型分析、蛋白组分布模式和对应的空间信息；通过额外z轴维度携带的丰富信息获得 3D 数据的直接解释，对组织中的免疫细胞、癌症指纹和结构特征进行功能性描述。

完全集成的简化流程，智能数据管理和高级控制，还有灵活性和自定义设置

智能指导的极简设置，定义一个组合即触发实时计算并给出显微镜设置基础建议，以最大限度地提高信噪比和最小化串扰；自动进行采集设置，通过先进的拆分算法采集数据，减少人为错误又节省时间。内置人工智能图像分析软件Aivia提供量身定制的分析，准确解读高分辨率三维数据。自动生成未混合数据以及相应的原始图像，便于进一步分析和解读。为有经验的用户提供更多选项，便于设计实验和探索最佳染料组合；可以对系统设置进行微调，以适应特定样本的差异。

采用稳健、快速且灵活的方法对癌症组织进行基于3D成像的评估对于了解肿瘤微环境的变化、做出决策并设计更好的后续实验是非常重要的。使用一次成像的好处不仅是更简便快速的流程，还便于进一步探索那些具有靶标信号的感兴趣区域（ROI）——例如，以不同的放大倍数和更高分辨率来进行更详细的空间表征；此外在给定时间内所有标记在3D环境中共存确保了组织中发现的相互作用位于特定时空背景的微环境中。

徕卡公司生命科学与应用解决方案副总裁James O´Brien表示："SpectraPlex的开发是为了让研究人员在研究复杂的疾病状态时能够获得空间分辨率更高的三维数据，从而对病理状况进行更深入的分析。使用SpectraPlex 获得的数据可以推动新细胞类型的发现、细胞状态的识别以及三维空间背景下功能关系的绘制，有助于了解疾病的进展和潜在治疗目标的识别。”