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与常规试剂比较,这种试剂能更清晰详细地揭示病毒
【字体: 大 中 小 】 时间:2022年05月30日 来源:Scientific Reports
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日本的研究人员通过在纳米尺度上对病毒成像,证明了一种新的非放射性中性阴性染色试剂的好处。盐提呈试剂是一种结构稳定的中性分子,与常规使用的试剂乙酸铀酰相比,具有更长的货架寿命和更少的采购限制。他们在5月12日的《科学报告》上发表了他们的研究结果。
眼见为实,而对科学家来说,眼见为实是理解的开始。研究人员可以用透射电子显微镜(TEM)将原子上的小细节可视化,方法是将电子射入样本并捕捉它们之间的相互作用,从而形成图像。但这样的微小标本可以避开电子,因此需要用重金属对它们进行特殊处理,以确保它们之间的相互作用。例如,要观察病毒,目前的标准是用一种含有放射性物质的溶液浸泡病毒样本,这种物质被称为醋酸铀酰,受到严格控制。
广岛大学高级科学与工程研究生院应用化学教授Masahiro Sadakane说,得到的图像很清晰,但获取和存储所需的放射性重金属溶液的过程对研究人员来说可能是一个复杂的障碍。Sadakane和他的团队最近发现,非放射性处理可以产生同样清晰、详细的图像,而不会像醋酸铀酰那样繁琐。
他们在5月12日的《科学报告》上发表了他们的发现。
该论文的通讯作者Sadakane说:“观察病毒形态在病毒学中是必不可少的,TEM是使用最广泛的技术,因为它可以在纳米尺度上直接可视化,但目前它需要含有重元素的阴性染色试剂。”“全世界都需要新的、非放射性化合物,用传统的TEM进行简单、快速和清晰的观测。”
目前商业上可替代放射性乙酸铀酰的是一种名为“keggin型”的磷钨酸。这种分子由一个磷酸盐和四个氧组成的中心单元,被钨和更多的氧紧紧包围。Sadakane说,虽然没有放射性,但这种分子是高酸性的,必须在使用前进行中和。他还指出,它产生的图像比用乙酸铀酰制作的图像更不清晰。然而,尽管有这些缺点,试剂属于一个类似的-可能更好-化合物的大家族。
Sadakane说:“我们一直在研究磷钨酸盐化合物,以前报道过‘preyssler型’可以作为阴性染色试剂来观察细菌的精细结构。”
preyssler型分子也包括钨、氧和磷酸盐,但它们在结构上围绕着包裹的正电荷离子,如钠或钙。它们与keggin型化合物有不同的结构,导致分子更稳定,以钾盐的形式产生。”
研究人员使用preyssler型磷钨酸盐对三种感染细菌的细菌病毒(噬菌体)进行染色和成像。这些噬菌体的形态结构已经被很好地记录下来,为检查他们研究中获得的图像的清晰度提供了可靠的参考。
Sadakane说:“我们的结果表明,preyssler型磷钨酸盐是很好的病毒观察阴性染色试剂。”“它们很容易使用,因为它们没有放射性,不需要调整pH值,而且它们能提供清晰的图像。”
据Sadakane说,研究人员计划在他们的发现的基础上开发一系列非放射性负染色试剂,以观察其他病毒,以及蛋白质等小有机颗粒。
Preyssler-type phosphotungstate is a new family of negative-staining reagents for the TEM observation of viruses