新品上市！Gibco AAV-MAX Helper-Free AAV 生产系统

要想满足商业化需求，经济高效的可扩展的腺相关病毒 (AAV) 载体生产必不可少，平稳扩大至临床生产规模也十分必要。我们开发的 Gibco™ AAV-MAX Helper-Free AAV 生产系统能够有效降低生产成本并简化从研究过渡到临床规模的过程。

AAV-MAX 系统特点：
• 高 AAV 滴度 — 单位生产体积可收获更多病毒颗粒，降低生产成本
• 可扩展性 — 悬浮系统具有可扩展方案，涵盖从摇瓶到生物反应器的不同规模
• 简化的工作流程 — 利用无辅助病毒三重转染的精简方案；裂解缓冲液可简化下游处理
• 无动物来源 (AOF) — 无动物或人类来源组分，可降低原材料安全风险
• 克隆化的 293 F 病毒生产细胞 — 细胞库的生产符合医疗器械 cGMP 标准的要求

图 1.AAV-MAX Helper-Free AAV 生产系统包含的组分。

经过优化的完整系统

AAV-MAX 系统的各个组分经协同优化，可获得最大病毒滴度，且无需对试剂和方案进行优化。完整的 AAV-MAX 系统，无论是效率还是病毒生产滴度都要高于替换单个组分后的系统或使用常规的聚乙烯亚胺 (PEI) 转染试剂的系统（图 2）。

图 2.完整的系统可实现最大性能。使用 AAV-MAX 系统在 125 mL 摇瓶中以 30 mL 规模生产 AAV2 和 AAV6。评估了完整 AAV-MAX 系统的性能，对比了使用替代转染试剂时的性能结果。通过 qPCR 测量滴度，数据被归一化为完整 AAV-MAX 系统的滴度 (vg/mL)。

在多种血清型中均可获得高病毒滴度

创新的 AAV-MAX Helper-Free AAV 生产系统是一套完整且经过优化的悬浮系统，可在多种 AAV 血清型中无缝且有效地生产高滴度 AAV 载体（图 3）。

图 3.针对多种 AAV 血清型，AAV-MAX 系统均能生产高滴度病毒。本系统用于在 125 mL 摇瓶中以 30 mL 规模生产 5 种 AAV 血清型。数据显示，该系统在全部 5 种血清型中都实现了高病毒滴度、高细胞活力和高活性细胞密度 (VCD)。通过 qPCR 测量滴度。

经济高效的 AAV 生产解决方案

使用 AAV-MAX 系统时，与基于 PEI 的生产系统相比，使用更少量的培养基即可获得相同的病毒滴度，从而减少了下游的纯化操作量、实验室空间和劳动力。使用较小的批次也可以减轻污染风险。此外，相比于替代转染试剂，AAV-MAX 系统每 1 x 106 个细胞所需的质粒 DNA 更少，进一步降低了生产成本。

扩大规模，满足需求

现有 AAV 生产系统面临的挑战包括：较低的滴度，符合医疗器械 cGMP 生产标准的质粒 DNA 成本较高，可扩展性差，缺乏符合医疗器械 cGMP 生产标准的试剂。AAV-MAX 系统是一套可扩展的悬浮培养平台，能够在大规模培养时仍然保持高病毒滴度（图4，5），该平台的试剂经过了预优化且符合法规要求，专为高 AAV 滴度生产而开发，让您无惧上述挑战。

图 4.本系统在多个生产规模中都可获得高滴度病毒。使用 AAV-MAX 系统在四个不同规模的摇瓶中生产 AAV2 和 AAV6。通过 qPCR 测量滴度，数据被归一化为 125 mL 摇瓶中 30 mL 生产规模的滴度 (vg/mL)。

图 5.在摇瓶和生物反应器规模下实现高病毒滴度。使用 AAV-MAX 系统在 125 mL 摇瓶（30 mL 生产体积）和 3 L 生物反应器（1.8 L 生产体积）中产生 AAV2。通过 qPCR 测量滴度，数据被归一化为 125 mL 摇瓶中 30 mL 生产规模的滴度 (vg/mL)。

源于 293F 细胞系的克隆细胞

病毒生产细胞 2.0：
• 克隆化的 293F 病毒生产细胞, 倍增时间短
• 在化学成分明确的培养基中经过优化，适合用于高密度悬浮培养（> 1200 万个细胞/mL）
• 不含 SV40 大 T 抗原，没有基因工程化
• 稳定的可扩展性和传代稳定性（图 6-8）
• 提供完善的文件证明，CTS 细胞库（2022年上市）生产符合医疗器械 cGMP 标准的要求

图 6.病毒生产细胞 2.0 在多次传代中保持相似的生长曲线。在病毒生产培养基中培养细胞，
并在接种后第 4 天至第 7 天测量细胞活力和 VCD。

图 7.病毒生产细胞 2.0 在多次传代中仍保持约 23.5 小时的倍增时间。
基于接种后第 3 天和第 4 天之间的生长来计算倍增时间。

图 8.病毒生产细胞 2.0 在反复冻融后仍保持良好的细胞活力和高活细胞密度 (VCD)。
解冻细胞，并在解冻后 3 天监测细胞活力和 VCD。

订购信息

产品	大小	货号
Gibco AAV-MAX Helper-Free AAV 生产系统	1 套	A51217
Gibco AAV-MAX Helper-Free AAV 生产系统， CN	1 套	A51217CN
Gibco 病毒生产培养基	1 L	A4817901
	6 x 1 L	A4817902
	10 L（袋装）	A4817903
Gibco 病毒生产细胞 2.0	1.0 mL（1 x 10⁷ 个细胞），CN	A52021
	1.0 mL（1 x 10⁷ 个细胞）	A49784
	6 x 1.0 mL（6 x 1 x 10⁷ 个细胞）	A51218
Gibco AAV-MAX 转染试剂盒 ·        Gibco AAV-MAX 转染试剂 ·        Gibco AAV-MAX 转染促进剂 ·        Gibco AAV-MAX 增强剂	适用于 1 L 培养	A50515
	适用于 10 L 培养	A50516
Gibco Viral-Plex 络合缓冲液	100 mL	A4983901
Gibco AAV-MAX 裂解缓冲液	100 mL	A50520