Nature Protocols核酸纳米颗粒免疫学检验新方法

　　

实验室制造的DNA或RNA有时被用作治疗性核酸，以阻断或修饰基因、控制基因表达或调节其他细胞过程。这个有希望的生物医学治疗领域仍处于新兴阶段，有一些药物开始使用，还有更多药物正在进行试验。

核酸纳米颗粒（NANPs）是一种可编程的组装体，它是由核酸制成的，具有许多治疗性核酸序列，以特定的结构嵌入其结构中，设计用于同时包装和递送多种细胞间或细胞外治疗。

新疗法在临床上的主要阻碍是对基于NANP制剂的不良免疫反应。在《Nature Protocols》一篇文中，Frederick癌症研究国家实验室的Marina Dobrovolskaia和北卡罗莱纳大学夏洛特分校的Kirill Afonin描述了一个可复制的准确地评估不同NANPs在用于运送治疗性核酸时的定性和定量免疫特性方案。

这很重要。“约10-20%的核酸药物在临床试验中由于免疫毒性而被撤销，”Afonin说。“NANPs有太多未知的可能阻止它们进入临床试验的免疫特性，你想在花费数十亿美元试验经费后，因不良免疫反应而下架吗？所以，我们应该在将药物用于患者之前仔细预测药物的免疫刺激。”

该protocol提出了一个详细的逐步方案，并以人类外周血单核细胞为模型，评估任何给定的NANP设计对人体的炎症特性。论文中的体外实验使用了100多名健康献血者的血液和分离细胞。血液是在一年的不同时期抽取的。

“这个protocol是可复制的，它使用了最精确的模型，”Afonin指出。“这比用动物模型更能预测细胞因子风暴。我们为更多研究人员节省了经费，因为他们无需再研究动物模型了。”

“数百人在研究NANPs，每个人都有自己喜欢的步骤，问题是这些不同的protocol在你阅读出版物时很难说清楚哪个更好，因为这些测试的条件完全不同，”Afonin说。

新protocol测量了细胞免疫反应的量和性，包括免疫反应的规模和免疫反应的天然属性——免疫反应引起了哪些确切的化学反应。

定量和定性NANPs的免疫反应，产生何种干扰素或细胞因子，这些数据有助于疫苗佐剂研究。

“该protocol用超过60个不用NANPs设计验证过了，我们的目标是统一这项测试，使之成为未来研究的里程碑，”Afonin说。

原文检索：Use of human peripheral blood mononuclear cells to define immunological properties of nucleic acid nanoparticles

（生物通：伍松）