用CRISPR技术开发新型筛选工具

中佛罗里达大学的一组研究团队利用CRISPR基因编辑技术，开发了一种用于筛查帕金森的工具。该技术可特异地“点亮”α-突触核蛋白（与帕金森有关的脑蛋白）。

　　

本文作者之一YOON-SEONG KIM

生物通报道：

“我们每个人都有α-突触核蛋白，”Burnett生物医学学院博士生Levi Adams说。“但是当出现帕金森后，该蛋白在脑部的含量出现异常。如果我们能‘看’到这种蛋白质在细胞内的变化，我们就能找到让它含量上升的原因和让它下降的措施。”

这项由美国国家卫生研究院资助，发表在Scientific Reports上的研究成果，将可能成为帕金森新药治疗效果识别的关键一步。

研究人员使用了CRISPR-Cas9基因编辑技术，在α-突触核蛋白基因的3’端插入荧光标签（NanoLuciferase），每当细胞产生α-突触核蛋白时，便会同时表达荧光标签，发出荧光。亮度越大α-突触核蛋白的水平越高，疾病的危险指数越高。研究小组发现，采用荧光测量（luciferase activity），是衡量α-突触核蛋白生产的可靠方法。

“如果我们对这些修饰过的细胞使用特定的药物，如果它们不再发光，就意味着该药物是这种疾病的潜在治疗靶向药，”参与了这项研究的另一位博士生Sambuddha Basu说道。

“通过更容易测量的荧光值，我们还能对患者细胞进行高通量的药物筛选，同时测试一大板药物。”帕金森科学家、本文通讯作者Subhrangshu Guhathakurta说。

接下来，研究小组将利用这种检测方法，寻找α-突触核蛋白杀死神经元的影响因素。

原文标题：A novel tool for monitoring endogenous alpha-synuclein transcription by NanoLuciferase tag insertion at the 3′end using CRISPR-Cas9 genome editing technique

延伸阅读：Nature Methods：蛋白质相互作用高通量筛选新系统

 

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