细胞来源的纳米囊泡（Gesicle），使Cas9和sgRNA导入so easy![新品推荐]

对于分裂细胞、非分裂细胞、iPS细胞而言，其低的转染效率会导致基因编辑效率降低。针对这种情况，Takara旗下Clontech的Guide-it产品线推出一款纳米囊泡（Gesicle）系统，在CRISPR/Cas9 基因编辑难转染细胞时，轻松实现Cas9和sgRNA的导入。

第三代基因组编辑技术CRISPR/Cas9，以RNA为基因组定位工具，靶点位置更多，设计操作简单易行，使得基因编辑应用变得广泛起来。Takara旗下Clontech的Guide-it产品线为CRISPR/Cas9基因编辑实验提供完整的解决方案，包括前期sgRNAs设计、sgRNAs获取及体外效率评估、Cas9和sgRNA导入、以及后期基因编辑后单细胞基因型确认。

对于分裂细胞、非分裂细胞、iPS细胞而言，其低的转染效率会导致基因编辑效率降低。针对这种情况，Takara旗下Clontech的Guide-it产品线在2016年推出一款纳米囊泡（Gesicle）系统，解决了利用CRISPR/Cas9 基因编辑难转染细胞时，Cas9和sgRNA难导入的问题。

Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System是一种细胞来源的纳米囊泡，将Cas9和sgRNA包被其中，用于传递Cas9/sgRNA；Gesicle表面附有具有细胞膜亲和特性的NIGP蛋白质，使其可以与广泛的细胞类型相融合；Gesicle表面同样也附着有CherryPicker红色荧光蛋白质，使其便于通过荧光显微镜进行监测。

Cas9-sgRNA Gesicle可借助Gesicle Producer 293T细胞自行制备，根据所使用的不同sgRNA，可以制备产生靶特异Cas9-sgRNA Gesicle。整个制备过程简单易操作，只需要将表达sgRNA的质粒与试剂盒提供的Mix 1和Mix2混合后孵育一段时间后，将其添加至Gesicle Producer 293T细胞培养液中，在A/C Heterodimerizer异源二聚化配体的共同作用下，便可制备获得Cas9-sgRNA Gesicle，收集细胞培养液便可获取Cas9-sgRNA Gesicle。

将制备完成的Cas9-sgRNA Gesicle添加至靶细胞培养液中，Gesicle会与细胞膜发生融合并将Cas9/sgRNA释放至细胞内部，Cas9会在细胞内被分解代谢。Gesicle与细胞膜融合后，CherryPicker红色荧光蛋白质会被转移至靶细胞的细胞膜上，红色荧光蛋白质的存在，可以通过荧光显微镜监测Cas9/sgRNA的传递；由于Gesicle不会与细胞基因组发生整合，避免了基因整合所可能带来的潜在影响，降低了脱靶效应；由于Gesicle添加时间及剂量的可控性，使得可以在需要的时间进行基因编辑实验；Gesicle通过细胞融合的方式传递Cas9/sgRNA，因此Gesicle可适用于广泛的细胞类型。

 
（文中涉及图片均来源于Takara Bio USA, Inc.）

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