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通过 Opal 多重染色深入洞察组织样本
【字体: 大 中 小 】 时间:2016年12月29日 来源:珀金埃尔默
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颠覆传统免疫组化的创新型技术!解除相同种属来源抗体不能复染在一起的限制,轻松实现七色免疫荧光染色。通过辣根过氧化物酶介导的活化反应,将荧光信号直接富集标记到目标抗原上,在确保特异性着色的同时,大幅提高信号强度和稳定性。标记荧光分子以共价键形式与抗原稳定结合,通过洗脱抗体后的多轮复染,实现多色免疫荧光染色。
研究癌症生物学和评估复杂的生物学功能需要结合组织成像提供的背景,同步分析多个通路。常规方法提供的分析并不完整。流式细胞仪在复合分析中表现突出,但会破坏组织提供的原位信息。如果对连续切片中的单个标记物进行分析,则无法探求单细胞的共表达,尤其同时分析三个或更多标记物时更是如此。
多标记免疫组化染色存在诸多困难,例如抗体物种的相似性和交叉反应、多轮处理后的标签稳定性、高低信号之间的平衡以及弱表达标记物的检测等,因此,开发能同时检测FFPE组织或冷冻切片中三个或更多生物标记物的稳定方法充满挑战。
上图:乳腺癌免疫图像,PD-L1(兔)---黄色;CD8(小鼠)---红色;CD4(小鼠)--- 绿色;CD20(小鼠)---橙色;细胞角蛋白 AE1/AE3(小鼠)---青色;细胞核 (DAPI)---蓝色。
采用Opal方法和TSA Plus荧光试剂染色,在Vectra上成像。
图片来源:PerkinElmer组织应用团队
解决方案:Opal 多重组织染色
借助Opal™,您可以克服这些挑战,从而实现稳定且高特异性的组织生物标记物复染检测。您可以不根据物种而根据性能来选择抗体。典型的四重Opal染色流程可在一天之内完成,兼容标准IHC工作流程。
Opal 可以帮助您实现:
• 一次对三种或更多组织生物标记物进行染色和成像
• 使用在相同物种来源的多种一抗抗体, 并且不会产生交叉干扰
• 查看流式细胞仪丢失的原位背景
• 在同一个组织切片中确认多种生物标记物的单细胞共表达
• 节约宝贵的组织的同时获得更多信息
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