如何选择病毒学研究的细胞？

　　

生物通报道：病毒会感染几乎每一种生物机体，无论是人、老鼠、跳蚤还是细菌，都逃脱不了病毒的攻击。但是这些寄生生物无法独立生活：它们需要进入宿主细胞内部，这也就是为什么病毒学家也需要培养细胞，不过要想掌握这种细胞培养技术，就必须对病毒和宿主细胞都有所了解。

因为这个过程并不是简单的把病毒和细胞都放到培养皿中就行，因此要想真正掌握病毒学研究的细胞培养技术，还是需要花费一番功夫的，这里通过了解几位病毒学家的培养思路和技巧，介绍了一些病毒-细胞培养系统和方法。

如何选择细胞

选择哪种细胞取决于病毒，不过要找到正确的病毒宿主可能还要玩一下“侦探游戏”，最明显的首选场所就是作为病毒天然宿主的动物或者组织中的细胞，比如骆驼细胞就是中东呼吸综合征寻找宿主细胞的第一选择。

但想到并不一定就能做到，美国国立卫生研究院国家过敏症和传染病研究院的副主任Marshall Bloom在开始研究阿留申水貂病（Aleutian mink disease）病毒的时候，他曾试过水貂细胞，以及每一种他能买到的哺乳动物细胞系，但唯一能发生感染的是猫肾细胞 (J Virol，73:3835-42，1999 年)。

如果一种病毒被证明十分挑剔，那么就可以多准备一些细胞系，如HeLa细胞系，这种细胞系能作为多种病毒的宿主，Bloom说，此外幼仓鼠肾 (BHK，Baby hamster kidney) 细胞和来自鸡胚胎的成纤维细胞也值得试试，来自佛罗里达大学的名誉教授Richard Condit建议道。

除了细胞类型，病毒学家还必须做出另一个选择，那就是选择直接从生物机体中培养的原代细胞，还是经过多年培养，传代多次的永生细胞系。两者都有利有弊。

永生细胞系，譬如HeLa的优点就是方便，易于生长，可重复性高。来自洛克菲勒大学丙肝研究中心的博士后研究员Mohsan Saeed指出，大多数病毒研究采用的就是这种细胞系。

但是这种细胞大多只能将其相似之处传递给生物机体中的另一细胞，它们不断分裂，改变了它们的新陈代谢，而且也经常发生去分化，重新回归到了原始状态。最关键的是，对于病毒学家来说，这些细胞系只是表现出异常的免疫应答活动，而不是像体内细胞那样对病毒产生防御力，因此从这些细胞系中得到的结果可能就是不确定的，或者错误的。

因此Saeed认为，如果可能的话还是用原代细胞。原代细胞看起来更像体内细胞，反应也更像体内细胞，但是这些细胞会出现并发症，它们需要特殊的培养技巧，而且最终还是会死亡。

如果一个实验室希望用的是人体原代细胞，那么这又要增加一层难度了。一般来说这些细胞内容可以通过商业化产品获得，如Lonza就要卖21种人体原代细胞，包括肝细胞 (300-600万细胞安瓿约为500 美元，注：美国当地价格)。

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然而，有时研究人员需要的组织类型并没有哪家公司有卖，或者希望选择特殊的细胞来源，那么他们就不得不去寻找医院细胞来源了。

与克隆系的统一细胞不同，捐赠组织会随着个体差异而发生变化，这可以是益处，也可以是坏处。一些研究人员希望了解病毒如何感染个体病患的，但是一般分子病毒学家还是希望重现性较好，但使用不同批次原代培养细胞，会增加重现性难度。

未完待续……