唾液收集与实验操作指南(一)

【字体: 时间:2015年07月06日 来源:生物通

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  虽然唾液相对于血液来说,更加容易收集,存储和运输,也更便宜,但是相关的流体研究和新型唾液,口腔诊断技术却并不方便和简单。因此设计相关的实验需要考虑已商业化可用的工具,合适的流程,稳定性,以及出现问题的策略。这些因素都会影响你的结果,尤其是如果你希望能定量分析的话。

  

生物通报道:健康成人三个主要的腺体每天大约要分泌1至1.5升的唾液,这些唾液中大部分是水,其它还包括电解质和蛋白质,例如形成粘液,分解食物和细菌的酶,以及分泌抗体所需的糖蛋白。

除了维护我们的口腔健康,通过唾液科学家们还能了解关于我们祖先,我们是否能对抗某种感染病原体,以及激素失衡的线索。未来这种液体甚至还能进行心脏病快速筛选,区分细菌还是病毒感染。实际上,唾液也能帮助研究人员了解口腔微生物组的特征,以及健康与疾病之间的潜在关联。

“在过去的几年中,唾液的用处得到了不少人的认可,”来自Oasis Diagnostics公司的CEO Paul Slowey说。其中一大原因是目前的一些技术都能敏感的检测分析和定量唾液中的DNA,RNA,代谢物和蛋白,这些成分在唾液中的水平含量要比在血液中的浓度要低100-1400倍。

虽然唾液相对于血液来说,更加容易收集,存储和运输,也更便宜,但是相关的流体研究和新型唾液,口腔诊断技术却并不方便和简单。因此设计相关的实验需要考虑已商业化可用的工具,合适的流程,稳定性,以及出现问题的策略。这些因素都会影响你的结果,尤其是如果你希望能定量分析的话。近期The Scientist杂志就总结了几位唾液研究专家,分享他们的秘诀。

样品类型:

全口腔唾液

这里包括唾液液体和所有的额外物,如来自口腔,鼻黏液的细胞,来自口部和口疮的血液,还有肠道菌群和食物残渣。通过口水或吐痰都可以收集到试管中。为了增加收集量,你也可以通过咀嚼一些不会干扰实验的东西来刺激唾液分泌,如原味口香糖,蜡或硅管之类的东西。此外在口香糖,漱口水和糖果中添加柠檬酸,也能增加唾液的分泌。

口腔黏膜渗出液和牙龈沟液

这些液体也会出现在口水中,但比全口腔唾液更能反应血液成分,来自纽约大学的颅面生物学,艾滋病研究组主任Daniel Malamud教授说。

而且这些液体也是检测IgG抗体这些口腔中有限成分的一个好来源。例如,美国食品药品管理局批准的OraQuick ADVANCE Rapid HIV-1/2 Antibody Test,这种检测方法收集的是黏膜渗出液中的抗体。黏膜渗出液是流经粘膜上皮表面的一种超滤血,受试者只需手持一种特制医用海绵在上牙和牙龈以及下牙和牙龈之间滑动,以采集生物样本。使用者随后把海绵塞入一个小型测试仪器,等待20至40分钟,即可知道自己是否感染艾滋病毒。

这种快速口腔艾滋病检测仪在2012年获得了美国食品与药物管理局的许可,是目前唯一一种得到了美国政府许可的口腔艾滋病检测仪。

而牙龈沟液则是牙齿和牙龈缝隙之间的液体,“你可以通过纸棒进行收集,”Malamud说,“虽然这只有几个微升,但是研究人员可以进行生化分析实验。”

未完待续……

原文摘选:

Tools for Drools

A general guide to collecting and processing saliva
 

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