Cell技术突破:蛋白质研究的强大工具

【字体: 时间:2015年07月03日 来源:生物通

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  蛋白磷酸化是最常见、最重要的一种翻译后修饰,参与并调节了机体的多种生命活动,比如信号转导、基因表达、细胞周期等等。Salk生物研究所的科学家们开发了一种检测蛋白磷酸化的新技术,相关成果发表在七月二日的Cell杂志上。

  

生物通报道:Salk生物研究所的科学家们开发了一种检测蛋白磷酸化的新技术,相关成果发表在七月二日的Cell杂志上。

在蛋白质合成过程中,核糖体先将氨基酸连接起来,氨基酸链一边折叠一边延伸,然后在酶的作用下进行最后的修饰,其中就包括磷酸化。蛋白磷酸化是最常见、最重要的一种翻译后修饰,参与并调节了机体的多种生命活动,比如信号转导、基因表达、细胞周期等等。蛋白质磷酸化研究受到了研究者的广泛重视。

“每二十个氨基酸中就有九个被磷酸化,但我们对大多数磷酸化并不了解,因为它们很难研究,”文章的资深作者Tony Hunter教授说。

当磷酸化发生在三种氨基酸(丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸)上的时候,会形成较强的化学键。研究者们很容易就可以鉴定到这些磷酸化的位置。但如果另外六种氨基酸也磷酸化,磷酸基团的连接就比较松散,难以进行检测。其中最令人头疼的是组氨酸,“磷酸化的组氨酸非常不稳定,在分离蛋白的时候就会解离,”Hunter说。

研究人员意识到,要研究这种不稳定的相互作用,需要让磷酸基团和组氨酸之间生成更强的连接。于是他们使用了能够紧密结合组氨酸的膦酸酯(phosphonate)。随后,他们开发了特异性识别这种结合的抗体,这种抗体也能检测天然的磷酸化组氨酸。(延伸阅读:Science:一场磷酸化的争夺战

研究人员通过这一技术检测了一系列哺乳动物细胞,明确了抗体在细胞中结合的位置。研究显示,在细胞的某些部分,带有磷酸化组氨酸的蛋白特别多。

“我们惊讶地看到,细胞内有些区域的组氨酸磷酸化水平特别高,尤其是当细胞进行有丝分裂形成两个子细胞的时候,”Hunter说。目前研究人员还不清楚出现这一现象的原因,他们计划一边检测其它氨基酸的磷酸化,一边深入探索这些结果。

研究人员指出,如果你感兴趣的蛋白中含有磷酸化组氨酸,那么这些抗体就会成为非常有用的工具。“这一方法非常简单,任何实验室都可以使用,”Hunter说。“不需要什么特殊的设备。”

 

生物通编辑:叶予

生物通推荐原文:Monoclonal 1- and 3-Phosphohistidine Antibodies: New Tools to Study Histidine Phosphorylation

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