让细胞在你掌中流动 — MoxiFlow[新品推荐]

高端的细胞流式技术给我们带来了精准又漂亮的数据，但操作的高要求及平台仪器的排队使用，使流式与我们的距离越来越远，让研究者们对其望穿秋水。美国ORFLO公司*新推出的掌上灵动流式细胞仪MoxiFlow拉近了我们与流式细胞仪日渐疏远的距离，它的出现无疑是对流式细胞仪革新性的突破，将流式细胞仪请下神坛，飞入寻常百姓家 … …

提到流式细胞仪，可谓无人不知无人不晓，它的技术综合性强大到让人惊叹！我们先看一段对它定义性的描述：“流式细胞仪是将流体喷射技术、激光技术、空气技术、γ射线能谱术及电子计算机等技术与显微荧光光度计密切结合的一种非常先进的检测仪器。”相信单凭这若干个不知其意的专业词汇所彰显出的高端与大气就已让研究人员望而却步了。实际它的高端分两方面，其一，高端的技术。很少有像流式细胞仪这样的科研工具能够将如此多的学科汇聚于一身，所以操作使用起来也就理所当然的复杂与繁琐了，需要专业的学习与培训，所以往往有流式细胞仪的地方都要配一位驾驭它的专业技师；其二，高端的价钱。这样一台仪器的价钱不是每个实验室都可承受得起的，所以才导致它定居的地方一般都为大型平台实验室，来供多个实验室或整个学校的使用，这样一来就出现了一个现有的常见问题—— 僧多粥少，做流式细胞实验要预约，你的实验周期完全受到了它的“约会”安排日程表的影响，当我们享受着她带来的美丽数据的同时，她更像一个可望而不可即的女神一般，让你欢喜让你忧... ...

而她，是美国ORFLO公司*新推出的一台手持式微型流式细胞仪。她的外观灵巧，完全可将她托放与掌中，便于移动，让你的实验地点不再被庞大的仪器所束缚；操作便捷，无需受过专业培训就可以完成操作，因为所有操作就只有两步（Plug&Play），上机10秒后就可在彩色触屏显示器上看到实验结果，简便至极。价钱方面，对于绝大多数的实验室来说，如果想拥有她，从经济角度上讲是完全可行的。看到这里估计读者已经迫不及待的想进一步了解和认识她了，下面就由笔者向各位介绍这位灵动、聪慧的姑娘 — MoxiFlow(图1)。

图1 MoxiFlow

内 外 兼 修

对于它外观的小巧此处不再累述（大小规格仅为26×15×15cm），图片比文字更有说服力（图2）；仪器内置4500mAh锂电池，便于在实验室内的移动和随意放置；内置软件程序，480X320pix彩色显示器可清晰呈现数据结果，让您一目了然。至于检测方式，它采用了两种检测的完美融合—库尔特电阻原理与荧光检测原理：

图2 手持式流式细胞仪

一、 库尔特原理（用于检测细胞大小及数量）
当悬浮于液体中的细胞通过小孔管时，会取代相同体积的液体，在恒定电流设计的电路中导致小孔管内外的电阻发生瞬时变化，产生电位脉冲，而这种脉冲信号的大小和次数与细胞的大小与数目成正比，因此可用于细胞计数及大小的检测。这正是谈到流式细胞仪的历史而不可避开的库尔特原理，库尔特电阻检测法属于对细胞个体的测量和三维的测量，不但能准确测量细胞的大小，更能对细胞的绝对数量及浓度进行测量。利用库尔特原理检测细胞大小更近真实，而不像激光衍射散射原理会受到染料颜色和浓度的影响。流式细胞仪（FCM,Flow cytometry）,从字面上的cytometry (细胞计数) 也看得出它与细胞计数有着一定的渊源,Wallace Coulter于1947年发明了库尔特原理，用于血细胞分析，随后1953年Coulter公司便推出了世界上**台流式细胞分析仪。而以库尔特原理为主导技术开发细胞计数仪的ORFLO公司在此推出这样一台众望所归的微型流式细胞仪也便是名正言顺了，并利用其**的薄膜传感器技术对细胞进行数量、直径等检测，获取更加精准可靠的数据。

二、 荧光检测（用于检测荧光信号）
MoxiFlow配置了一根532nm固态激光器和一个PMT，检测光谱区域为590/40nm ( 可检测染料：R-PE, PI, Nile Red， Ethidium Homodimer I & III, Sytox Orange等 )。对细胞大小检测的同时以传统流式的方法利用激光激发标记在细胞上的特异性荧光染料，并通过PMT进行检测，获取荧光信号。

MoxiFlow 即利用了以上两种检测方式相结合的方式，在细胞流经小孔管时，同时对细胞的大小、数目及荧光信号进行精确的检测（如图3）。

          

                      图3 MoxiFlow检测原理                          图4 细胞微流膜片

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一、 简易化操作
微流体系膜片内设细胞过滤功能，所以对于准备上机的细胞悬液无需进行滤网的过滤，直接即可加入膜片孔内准备实验（如图4），此外膜片的窗口处为非透明材质做成，形成小的避光暗室，避免了荧光检测过程中荧光猝灭现象；仅需两步即可完成所有操作步骤。一，将细胞微流膜片插入检测口；二，将50μL样品加入检测孔内，点击Play即可开始检测 （如图5~6）；仅10秒钟即可显示出实验结果。输出数据的格式为标准的流式数据格式FCS3.1或.BMP的图像输出格式，结果数据可以以散点图及直方图（如图7）的形式表现出来，并可轻松用手触摸。

     

                               图5 放置细胞微流膜片                  图6 上样50μL细胞悬液即可检测

二、 程序化实验
MoxiFlow将较为常用的流式实验程序化为软件中的多个选项 （如图8，并在不断更新升级中），在实验室过程中只需点击要进行的实验名称即可完成相应的数据检测，如： 细胞活性检测、 细胞凋亡检、 多参数分析、细胞大小检测、荧光珠子检测、 细胞周期检测（coming soon）等，使用系统内相应实验程序即可，应用哪里，点哪里，无需再对电压、荧光补偿等参数进行调整。没有经过任何专业培训的人员也可轻松操作完成，可见MoxiFlow解放了科研人员对于流式细胞仪使用操作的繁琐性及专业性，是对流式细胞仪的一次崭新的革命。

  

                    图7 MoxiFlow 直方图与散图                                     图8 预设应用程序

性 能 表 现

为了展现出MoxiFlow优秀的检测性能，下面分别将MoxiFlow与台式流式细胞仪、成像细胞分析系统、血细胞计数板进行比较。结果发现，对于细胞的计数误差要低于其他类型产品，而计数平均值的变异系数（CV）也是*小的，可见 MoxiFlow对于细胞数量的检测表现优秀(图9 左)；对于细胞活性的检测误差值与平均活性检测的波动性（CV）都是*小的，即在对细胞活性检测的实验中，MoxiFlow依然很好地保证了数据的精准度和稳定性（图9 右）。

图9 MoxiFlow与各种检测方法的比较

下图是MoxiFlow细胞凋亡实验的结果图，此实验是用喜树碱（一种抗癌药物）对Jurkat 细胞（白血病细胞）分别刺激不同时间（2h，6h，7h）所得到的散点图。可以评测出该药物对Jurkat细胞凋亡的作用，并给出各个群落的细胞数量、细胞浓度、占细胞总数的百分比及细胞的平均直径等信息。

图10 MoxiFlow对细胞凋亡的检测

总结

外形的小巧并没有影响MoxiFlow的应用性能，所谓，麻雀虽小五脏俱全。它可帮你摆脱对流式细胞仪“想爱不敢爱”的矛盾心理，让流式不再高不可攀，让细胞在你的掌中流动。

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