Sigma推出基因组编辑工具CRISPR[新品推荐]

生物通报道 Sigma-Aldrich公司近日宣布推出Sigma CRISPRs，一款经济的哺乳动物基因组编辑工具，适合筛选和探索性研究。这是继锌指核酸酶（ZFN）以来，Sigma推出的第二款基因组编辑工具。

CRISPR指的是规律成簇的间隔短回文重复（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）。CRISPR/Cas是在大多数细菌和古细菌中发现的一种天然免疫系统，可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。Sigma CRISPRs利用可定制的RNA-核酸酶复合物来实现哺乳动物基因组特定位点的编辑。

在细菌中，来自入侵病毒的短DNA序列（间隔区）被掺入CRISPR位点，充当之前感染的“记忆”。再次感染引发互补的成熟CRISPR RNA（crRNA）找到匹配的序列，为CRISPR相关（Cas）核酸酶在特定DNA序列切割双链提供了特异性。

Cas9是由crRNA和tracrRNA（反式激活crRNA）引导、切割特定DNA序列的核酸酶。引导RNA（gRNA）可设计成包含发夹结构，以模拟tracrRNA-crRNA复合物。结合特异性是根据gRNA和三核苷酸NGG序列（protospacer adjacent motif，PAM）。对于位点特异的编辑，CRISPR/Cas9系统至少需要Cas9核酸酶和gRNA。

Sigma CRISPRs以单个质粒载体提供，其中包含GFP，可快速富集编辑过的细胞。当然，您也可以利用专门的生物信息学工具在线定制（www.sigma.com/crisprs）。

Sigma独有的在线设计工具让用户可根据CRISPR/Cas靶定的要求，识别人、小鼠和大鼠外显子中的最佳靶位点。它能够自动应用CRISPR/Cas最佳设计实践，包括靶位点与基因组中其他位点至少要求3个碱基对不匹配，从而最大限度减少了脱靶效应。

“Sigma在2008年开发出CompoZr ZFN技术，如今ZFN已成为基因组编辑的金标准。我们利用这一专长创造出Sigma CRISPRs，它让研究人员以更快、更经济的方式筛选目的基因。在利用Sigma CRISPRs 鉴定出重要靶点之后，可通过超特异的CompoZr ZFNs 来验证生物学上相关的突变，以减少潜在的脱靶，”Sigma Life Science功能基因组学市场部经理Shawn Shafer博士谈道。

Sigma-Aldrich研发部门的首席研究员Greg Davis博士认为：“操控哺乳动物基因组的能力对生物学而言是革命性的。Sigma CRISPR/Cas技术作为一款早期、经济的基因编辑工具，为开发和使用带来巨大希望。”（生物通 余亮）

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