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创新参选:目的片段与骨架载体的高效率连接
【字体: 大 中 小 】 时间:2013年05月09日 来源:生物通
编辑推荐:
实验室构建载体时常常遇到目的片段与PMD-19T或骨架载体连接不上的问题,尤其是对于一些比较大的目的片段,常常会出现连不上,骨架载体自连或连接效率低的问题……
参选项目:目的片段与骨架载体的高效率连接
背景:
实验室构建载体时常常遇到目的片段与PMD-19T或骨架载体连接不上的问题,尤其是对于一些比较大的目的片段,常常会出现连不上,骨架载体自连或连接效率低的问题。本人现在改进的方法能够明显解决这些问题。
方法改进:
连接的一般体系为:solution I 5ul ,骨架载体(PMD-19T) 1ul,目的片段4ul 或者:T4 连接酶1ul ,骨架载体(PMD-19T) 1ul,目的片段23ul,buffer 1ul。改进后:solution I 12ul ,骨架载体(PMD-19T) 1ul,目的片段11ul,T4 连接酶1ul 连接过夜 16℃
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