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创新参选:MTT实验中降低复孔间差异的技巧
【字体: 大 中 小 】 时间:2013年04月11日 来源:生物通
编辑推荐:
MTT是检测细胞存活和增长的经典方法,MTT从细胞接种到吸光度值的读取需要多个人工操作步骤,因此试验结果的精确性往往受到很多人为操作因素的影响,通常为确保准确性各处理组内需要设置3-4个复孔……
生物通报道:“赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。
参选项目:MTT实验中降低复孔间差异的技巧
背景:
MTT是检测细胞存活和增长的经典方法,MTT从细胞接种到吸光度值的读取需要多个人工操作步骤,因此试验结果的精确性往往受到很多人为操作因素的影响,通常为确保准确性各处理组内需要设置3-4个复孔,其中复孔间的差异除了受接种时孔间细胞数量一致性影响之外,之后的加入MTT作用后去上淸一步要求操作小心,如果不小心在吸取上清过程中将结晶的甲瓒(Formazan)碰落,对结果会影响很大。
方法改进:
对于如何防止形成的甲瓒被碰落吸走从而影响结果的准确性,我的方法是用1ml注射器代替移液器,将针头的斜切面靠紧96孔板孔底部侧面,缓慢吸出MTT作用后上清,这样就可以尽量减少吸走液体时对底面甲瓒的扰动,防止其掉落。这一方法尤其适用于贴壁不牢和悬浮细胞的MTT实验。
赛默飞特约之生物通2012实验室创新技术评选活动: http://www.ebiotrade.com/custom/ebiotrade/cxjs-2012/index.htm