创新参选：如何减少功能性包涵体洗涤过程损失蛋白

　　

“赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。

参选项目：如何减少包涵体洗涤过程损失蛋白

背景：

外源基因原核系统表达时目的蛋白多以包涵体形式存在，由于蛋白质理化性质的复杂性，要获得高收率的功能蛋白需要不断探索变复性及纯化工艺。主要的优化步骤包括包涵体制备，细胞破碎和包涵体洗涤溶解过程。其中在包涵体溶解前通常需要洗涤除去脂类、核酸等杂质，虽然功能性包涵体与传统包涵体在形成过程以及蛋白组成上有很大的不同，因此洗涤损失的功能蛋白较少，但是有时还是会出现目的蛋白损失。

方法改进：

功能性包涵体在经酸（pH4.0）沉淀后，再经过1%脱氧酸钠进行洗涤，这样目的蛋白的损失会减少，这可能是因为中性环境中的包涵体结构比较疏松，而酸性环境下包涵体结构更加致密（ 沉降速度更快）的缘故。

结果：能更好的减少功能性包涵体洗涤过程中损失的蛋白

 

赛默飞特约之生物通2012实验室创新技术评选活动：http://www.ebiotrade.com/custom/ebiotrade/cxjs-2012/index.htm