BioTechniques：2013年细胞分析文章精选

　　

生物通报道：理解细胞的结构和功能是现代生物学不断努力的目标。但对细胞进行深入分析，要依赖相应工具和技术的发展，在此基础上人们才能一窥细胞的微观世界。BioTechniques杂志在2013年的细胞分析技术文章中，精选了三篇加以推荐。

1. A simple and rapid method for generating patterned co-cultures with stable interfaces

在天然组织中，不同类型的细胞以特定模式排列，这样的结构对于组织的正常功能非常关键。体外细胞图形化（cell patterning）技术，能够操纵细胞的空间排布，在一定程度上模拟天然的组织结构，形成更接近体内环境的培养平台。尽管这一技术适用于药物筛选，但目前的方案往往需要人工模版进行定位，不仅繁琐、通量低而且成本较高。

2013年7月，多伦多大学的Alison McGuigan及其团队，想到了一个特别巧妙的解决方法。他们利用倾斜的平板，实现了BSA溶液的差异化沉积，并在此基础上对两种细胞进行共培养。这一方法不需要制造模版或复杂的设备，而且兼容96孔板，支持高通量应用。尽管为了获得最佳倾斜角度，需要进行多次尝试，这一方案仍能节省大量时间和成本，很值得一试。

2. High-throughput quantification of early stages of phagocytosis

在发育和先天免疫等多种基础生物学过程中，吞噬作用非常关键。目前分析吞噬作用的方法，主要限于流式细胞仪和手动成像分析，无法实现高通量的快速筛选。

今年九月，昆士兰大学的研究团队提出了一个以成像为基础的自动化分析方案，能够分别定量吞噬作用的三个阶段。这一技术可以只在荧光标记的细胞中定量吞噬作用，还可以检测内化过程的时间，识别药物对吞噬作用的干扰（如丝状肌动蛋白和磷酸肌醇-3激酶的抑制剂）。文章为研究者们提供了研究吞噬作用的高通量方法，有助于测试药物分子的影响。

3. Correlative light microscopy for high-content screening

高内涵成像能够为人们提供大量的显微数据，因此人们越来越希望将宽场成像、共聚焦技术和超高分辨率技术结合起来，形成能整合不同成像模式的平台。Flottmann等人11月发表文章描述了这样的应用平台，用三种不同技术实现了，顺式和反式高尔基体标记物的高分辨率成像。他们先在低分辨率的宽场显微镜下选择细胞，然后重新定位并通过共聚焦和超高分辨率技术成像，既获得了低分辨率的全细胞图像也得到了单分子信息。文章描述的相关光学显微镜（correlative light microscopy），同时呈现了细胞的全景和局部细节。