创新参选:组织RNA提取技术改进

【字体: 时间:2012年09月06日 来源:生物通

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  在RNA提取过程中,通常会选用液氮,但是用液氮提取稍大块组织时,遇到液氮变得很硬,组织在研钵中容易受到研磨棒的压力而溅出研钵使得组织丢失……

  “赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。

生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些精美礼品寄出,同时近期我们还将进行抽奖,以飨读者。

 

参选项目:组织RNA提取

背景:在RNA提取过程中,通常会选用液氮,但是用液氮提取稍大块组织时,遇到液氮变得很硬,组织在研钵中容易受到研磨棒的压力而溅出研钵使得组织丢失,另外一种情况是提取很小和很少量的组织时(比如提取一根触角的RNA),由于研钵体积较大,会粘很多在研钵表面,使得珍贵的样品减少。

方法改进:采用1.5ml离心管+塑料筷子方法试验准备:在市场上购买塑料筷子(我们曾经是在食堂拿了几根,不推荐),从小头部分截取1/3丢掉,剩下的2/3比着1.5ml离心管磨成能匹配离心管的底部即可,(路边找块石头或砖头即可完成),磨好后可以和枪头这些一块灭菌处理,提取很少样品RNA时,将样品放入1.5ml无RNase离心管,离心管放到蓝色托板上(我们实验室叫48孔蓝板),加入少许液氮(这里可以用一次性纸杯,将口捏一个小角,从小角处倒出,记住放入杯托,不然很凉哦),旋转研磨,液氮快干时再加入一次液氮,重复研磨,再加入trizol,后面步骤就一样了;对于大块样品,先放入离心管,加入液氮,迅速用磨好的筷子左右旋研磨,一会就成细粉末了,不行就再加一次液氮,呵呵,将粉末迅速倒入研钵中,加入液氮继续研磨,因为组织较大,离心管里就不适合加trizol了,所以放到研钵中,再按照以前的方法做就好了!

结果:结果超好哦,老师再也不用担心我提不出RNA了

 


 

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