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TaqMan突变分析灵敏检测癌症突变[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2012年04月16日 来源:生物通
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TaqMan® Mutation Detection Assays可实现异质样本中极低水平突变的筛查,并在3小时内获得结果,而手动操作时间极少。去年Life Tech发布的早期计划覆盖了三个基因——KRAS、BRAF和EGFR。如今,检测分析覆盖了另外21个与癌症研究高度相关的基因,包括HRAS、NRAS、PIK3CA、KIT、PTEN和TP53等。
生物通报道 一年前,Life Technologies公司宣布推出TaqMan® Mutation Detection Assays。这是一个高度灵敏且新颖的研究工具,能够检测到隐藏在100万个正常拷贝的背景之下的单个突变分子。如今,Life Tech再次扩展其突变检测分析,可检测另外21个癌基因中241个最常见的突变。
TaqMan® Mutation Detection Assays可实现异质样本中极低水平突变的筛查,并在3小时内获得结果,而手动操作时间极少。去年Life Tech发布的早期计划覆盖了三个基因——KRAS、BRAF和EGFR。如今,检测分析覆盖了另外21个与癌症研究高度相关的基因,包括HRAS、NRAS、PIK3CA、KIT、PTEN和TP53等。
Life Technologies负责新一代qPCR的副总裁及总经理Sam Raha表示:“我们TaqMan突变分析的扩展如今为科研人员提供了非常强大的工具,可准确快速地拷问样本中更大范围的关键癌症突变。在未来,这项技术有潜力评估基于生物标志物的治疗。”
TaqMan® Mutation Detection Assays的核心是castPCR。何谓castPCR?它的全称是竞争性等位基因特异的TaqMan聚合酶链式反应(competitive allele-specific TaqMan® polymerase chain reaction)。这是一种新颖的技术,它利用特有的分析设计和试剂来扩增目的突变,同时利用抑制因子来沉默样品中野生型等位基因的扩增。再加上Life Tech金标准的TaqMan探针和引物,Mutation Detection Assays实现了行业中前所未有的灵敏度和特异性。
TaqMan® Mutation Detection Assays的特点:
1. 高特异性 – 突变等位基因的检测是基于等位基因特异的引物,而野生型背景由MGB探针阻断剂寡核苷酸所抑制
2. 高灵敏度 – 加标实验证明,此分析能够检测野生型gDNA背景中低于0.1%的突变分子
3. 宽的动态范围和出色的PCR效率 – 动态范围高达7个对数期,而PCR平均效率为100 ± 10%
4. 快速简单的流程 – 与其他TaqMan分析类似,从样本到结果只需要3个小时,而手动操作时间极少
突变分析可以两种方法开展。1)突变等位基因分析结合基因参考分析。这种方法使用最少的孔、样本和试剂,能够确定样品中突变碱基存在与否。2)突变等位基因分析结合野生型等位基因分析。这种方法能够高度准确地定量样品中的突变比例。(生物通 薄荷)