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2012聚焦转染:如何提高转染效率[心得点评]
【字体: 大 中 小 】 时间:2012年03月29日 来源:生物通
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生物通之前曾发布了不少有关转染心得的文章,覆盖了转染的方方面面,包括如何提高转染效率,DNA转染的注意事项,RNA转染的注意事项等。只是,文章太多,大家不一定好找。于是,在2012年的转染专题中,我们将这些文章汇总起来,以飨读者。
生物通之前曾发布了不少有关转染心得的文章,覆盖了转染的方方面面,包括如何提高转染效率,DNA转染的注意事项,RNA转染的注意事项等。只是,文章太多,大家不一定好找。于是,在2012年的转染专题中,我们将这些文章汇总起来,以飨读者。
DNA转染
这篇文章解释了转染体系的关键组分对细胞转染实验的效率有何影响,并且给予您一些关于如何使它们更有利于您研究方面的提示。虽由罗氏专家提供,但涉及的产品内容很少,大部分都是放之四海而皆准的理论。
有时需要根据细胞系来选择合适的转染方法;而有时一些启动子在不同的细胞系中表现的功能也不同。这些都是设计实验时需要考虑的因素,姑且不论。不过因为受限于特定的细胞,如何选择合适的转染方法就值得考究了。
启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。
RNA转染
转染时的细胞汇合度常常会比DNA转染高一点,也许是因为RNA转染表达比DNA快?RNA转染的用量必须参考转染试剂说明,因为RNA和转染试剂的比例决定了转染复合物的结构和净电荷,以及是否容易被细胞膜吸附和内吞。RNA少了固然表达不好,太多也会有毒性的问题。
如何优化siRNA转染?转染少量的siRNA为何很重要?在siRNA转染过程中为何应当避免细胞毒性?本文收录了与siRNA转染相关的常见问题,并附上QIAGEN专家的解答。