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创新参选:轻松让原核表达蛋白溶解的方法
【字体: 大 中 小 】 时间:2012年12月31日 来源:生物通
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在进行原核外源蛋白表达实验的时候,很多实验者会遇到让人头疼的问题,那就是尽管外源蛋白表达了,但是却因为形成了包涵体导致蛋白无法溶解,后续实验无法进行。
“赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。
生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些精美礼品寄出,同时近期我们还将进行第二轮抽奖,以飨读者。
参选项目:轻松让原核表达蛋白溶解的方法
背景:在进行原核外源蛋白表达实验的时候,很多实验者会遇到让人头疼的问题,那就是尽管外源蛋白表达了,但是却因为形成了包涵体导致蛋白无法溶解,后续实验无法进行。实际上,只要一个很简单的技巧,摇菌时在培养基中添加5%的乙醇,就可以轻松让蛋白溶解了。
方法改进:摇菌时在使用的TB培养基中,除了诱导剂IPTG和抗生素之外,再添加乙醇至终浓度为5%,室温下摇菌6h,然后按照常规方法提取蛋白就可以了。该方法已经推荐过他人使用,都得到了很好的反馈。
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