年度创新：Tali成像型多色细胞分析仪

参加2011生命科学十大创新产品评选，了解生命科学发展的新动向！对于整天和细胞打交道的研究人员来说，荧光显微镜可是不可或缺的研究工具。然而，谈到定量检测，它就无能为力了，只能依靠主观判断，结果基本靠猜。为此，Life Technologies公司推出了一款与众不同的细胞分析仪——Tali™成像型多色细胞分析仪。

　　

对于整天和细胞打交道的研究人员来说，荧光显微镜可是不可或缺的研究工具。通过它，可直接观察荧光蛋白的表达，了解细胞活力等状况。然而，此平台也并非完美。谈到定量检测，它就无能为力了，只能依靠主观判断，结果基本靠猜。流式细胞仪倒是能提供精确的统计数据，但却没有成像功能。

为此，Life Technologies公司推出了一款与众不同的细胞分析仪——Tali™成像型多色细胞分析仪（图1）。看到这款仪器，你是不是马上联想起Countess® 自动细胞计数仪？虽说它们两个都好像一瓣西瓜，但Tali™的功能要多得多呢。它是一款3通道（明场、绿色荧光、红色荧光）的台式分析平台，可开展快速、定量的GFP和RFP表达、凋亡和细胞活力分析。现在是时候和猜测说byebye了，因为Tali提供了悬浮细胞群体中荧光表达的精确统计信息。

 
图1. Tali™成像型多色细胞分析仪

借助Tali™图像型细胞仪，您可简便、快速地开展各种实验，比如快速分析GFP/RFP载体的转染效率，鉴定GFP或RFP阳性的细胞，利用annexin V和PI开展凋亡分析，鉴定细胞活力等。仪器小巧，可以方便地在您的实验室里找到容身之所。

它的优点还包括：
 功能多样——轻轻一触即可完成细胞成像和细胞测定
 准确——提供大量细胞分析数据，用于统计学显著性分析
 快速——每个样品仅需约1分钟时间即可完成三参数群体分析

而对于流式细胞仪用户，在使用流式设备对样品进行分析和分选前，您可使用Tali™图像型细胞仪快速检测样品的浓度和荧光，从而提高检测效率。

只需25 μL样品，Tali™成像型多色细胞分析仪就能在10至75秒时间内完成一次常规细胞群体分析。除明场通道外，Tali™成像型多色细胞分析仪还有两条荧光通道 (绿色和红色)，因此可同时计数绿色和/或红色荧光染色细胞以及表达GFP和RFP的细胞。此分析仪还能提供全面的数据和图形格式报告，并可导出数据，进行存档和样品比较。

Tali™成像型多色细胞分析仪采用直观的用户界面，使整个分析过程非常简单，只需6步：1. 选择分析；2，在玻片上加入细胞；3. 将玻片插入Tali™细胞分析仪中；4. 调整焦距；5. 按下运行；6. 即可收集并分析数据。分析过程介于10秒和120秒之间，这取决于视场数量和分析的复杂程度。

在分析过程中，Tali™成像型多色细胞分析仪扫描Tali™细胞分析玻片，收集20个视场的明场和荧光图像。对于1×106个细胞/mL的样品，每个视场大约包含5000个细胞。利用一台高灵敏度的照相机和一种图像处理和分析算法，Tali™成像型多色细胞分析仪能够以定量的方式捕获最微弱的信号，并以图形格式显示相关数据，比如细胞数 vs. 细胞大小，细胞数 vs. 荧光。

所有Tali分析都共享相同的流程和用户界面，不同的是内部算法所收集和分析的荧光通道。在每次运行之前，用户可通过触摸屏，选择收集的视场数（4、9、13、18或20）。在每个视场，Tali™成像型多色细胞分析仪捕获明场和荧光图像，之后利用图像分析算法计算整个细胞群体，并挨个确定细胞的荧光特征。它的算法不仅能区分单细胞和簇，还能根据簇面积和细胞平均大小来确定细胞数量。这下，不必担心搞不清单细胞和细胞簇了。

作为一个定量检测的平台，Tali™细胞分析仪的数据是否可靠呢？研发人员将此平台所产生的结果与高端的流式细胞仪进行了比较。他们发现，对于每种分析（凋亡、细胞活力、荧光蛋白表达）以及所检测的细胞类型，两个平台的结果是相当的（图2）。

 
图2. 在Tali™成像型多色细胞分析仪和流式细胞仪上分析细胞活力的比较。他们测定了五种不同细胞类型（Jurkat、U20S、293MSR、HEKn和CHO-S）的细胞活力。利用Tali™ Viability Kit对细胞染色，之后利在Tali™成像型多色细胞分析仪或流式细胞仪上测定。对于所有细胞类型，两种平台的结果是相当的。

目前，研发人员已经在Tali™成像型多色细胞分析仪上检验了13种细胞类型，包括：293 MSR、A431、A549、BPAEC、CHO-M1、HASMC、HDFN、HeLa、HEKn、JKT、MMM、NIH-3T3、U2OS。有了它，您可以轻松自信地开展多种细胞分析，再也不用靠猜了。

GFP/RFP分析

Tali™成像型多色细胞分析仪确定样品中发出绿色或红色荧光的细胞，以及未染色和不发荧光的细胞。同时，GFP/RFP分析可与活力分析结合起来。利用Tali™ Viability Kit – Dead Cell Red可确定表达绿色荧光蛋白的细胞，而Tali™ Viability Kit – Dead Cell Green可确定表达红色荧光蛋白的细胞。

凋亡

在凋亡分析中，利用Tali™成像型多色细胞分析仪可区分凋亡细胞、死细胞和活细胞。使用Tali™ Apoptosis Kit – Annexin V–Alexa Fluor  488 and propidium iodide，可以对每种细胞群体进行计数，并计算它们在样品中的相对量。

细胞活力

Tali™成像型多色细胞分析仪可确定活细胞和死细胞的数量及比例。正如上面提到的Tali™ Viability Kit – Dead Cell Red，它将死细胞染成红色。

快速计数

Tali™成像型多色细胞分析仪还能一个顶俩，当成Countess使，快速准确地进行细胞计数，而无需染色细胞。Tali™也能确定样品中的细胞浓度和平均大小。

当然，除了这些Life Tech开发出的分析，任何荧光染料或蛋白，只要能在绿色（FITC、Alexa Fluor 488等）或红色（RFP、PI等）荧光通道检测，就可用Tali™成像型多色细胞分析仪进行分析。如果你不太确定，可利用SpectraViewer在线工具查看（www.invitrogen.com/spectraviewer）。

如果您想了解Tali细胞分析仪的更多信息，请点击此处索取。（生物通 余亮）