新英格兰医学：血友病基因治疗突破性成果

　　

生物通报道  近日来自英国伦敦大学学院的研究人员在B型血友病的基因治疗临床试验中取得了突破性的进展，他们利用腺相关病毒（AAV）载体将表达FIX的DNA注入患者体内取了令人鼓舞的临床实验结果。相关研究论文发表在12月10日的《新英格兰医学杂志》（The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE, NEJM，影响因子58）上。

英国的维多利亚女王Victoria是历史上一位著名的血友病携带者，这位有“欧洲祖母”之称的女王，将血友病致病基因遗传至她的儿女，并由于其儿女同欧洲各王室进行广泛的联姻，从而使血友病波及了欧洲多个国家。后来研究证实这种影响整个欧洲的“皇家疾病”其实就是B型血友病。

血友病的发病原因是由于患者的血液中先天缺乏某种因子，根据缺乏因子的不同分为三种类型：甲型血友病（缺乏凝血因子Ⅲ，又称血友病A）、乙型血友病（缺乏凝血因子Ⅸ，又称血友病B）和丙型血友病（缺乏凝血因子Ⅺ）。B型血友病是由于缺乏蛋白凝血因子IX而发生的一种遗传性出血性疾病，可以发生肌肉和关节内出血，其中内出血尤其是脑出血可使患者致死。目前临床常用的治疗方法包括静脉内注射血液制品，更多是注射净化过的IX因子，这些传统的治疗方法虽然能改善症状，但却无法根治疾病。

基因治疗是指运用遗传信息相关的特异性DNA序列的转移来治疗甚至预防人类疾患的一种方法，是一项高度集成、综合性高难度的生物技术。近年来，发展基因治疗被视为预防和治疗遗传性疾病如血友病、杜氏肌营养不良以及感染性疾病如艾滋病的一种有潜力的策略。

此前，研究人员曾利用AAV载体对B型血友病进行基因治疗。但因T细胞免疫反应导致仅有过一过性的FIX表达。

为了避免上述情况发生，在这篇文章中研究人员采用了另一种修饰后的腺相关病毒血清型8（AAV8）作为了治疗载体。该载体在人类研究中较前者少见，其具有嗜肝性，可通过外周静脉进行治疗。

研究人员利用AAV8将表达FIX的基因按低、中、高剂量组（每组2人）通过手臂注射的方式导入到6名患者的体内，并且对这6名患者进行了6-16个月的追踪调查。检测结果显示在接受治疗注射后，所有患者血液中的FIX水平均达到了正常人的2-11%。其中的4名患者停止常规FIX预防后，均未发生自发性出血现象。另2名患者两次用药间的时间跨度显著延长。高剂量组的一名患者出现了短暂的无症状的血清转氨酶水平增高，另一名患者出现了肝酶水平轻微地增高。在给予短期的糖皮质激素治疗后，这两位患者的转氨酶水平很快恢复至正常水平，且FIX的水平维持在正常人的3-11%。

美国圣路易斯华盛顿大学的Katherine P. Ponder 博士在随刊述评中高度评价了这一研究成果：“这项具有里程碑意义的研究提供了基因疗法成功治疗B型血友病的首个‘明确证据’，标志着该治疗领域的一大进步。

研究人员表示，接下来还需要对更大样本量的患者进行更长时间随访，以便全面了解这种基因治疗的利与弊并优化给药方案，不过这项研究的结果已经表明这种疗法完全有可能把重度B型血友病转变为轻型疾病，也有可能逆转整个疾病进程。

（生物通：何嫱）

延伸阅读：Nature：基因编辑技术开启血友病治疗新篇章

生物通推荐原文摘要：

Adenovirus-Associated Virus Vector–Mediated Gene Transfer in Hemophilia B

Background
Hemophilia B, an X-linked disorder, is ideally suited for gene therapy. We investigated the use of a new gene therapy in patients with the disorder.

Methods
We infused a single dose of a serotype-8–pseudotyped, self-complementary adenovirus-associated virus (AAV) vector expressing a codon-optimized human factor IX (FIX) transgene (scAAV2/8-LP1-hFIXco) in a peripheral vein in six patients with severe hemophilia B (FIX activity, <1% of normal values). Study participants were enrolled sequentially in one of three cohorts (given a high, intermediate, or low dose of vector), with two participants in each group. Vector was administered without immunosuppressive therapy, and participants were followed for 6 to 16 months.

Results
AAV-mediated expression of FIX at 2 to 11% of normal levels was observed in all participants. Four of the six discontinued FIX prophylaxis and remained free of spontaneous hemorrhage; in the other two, the interval between prophylactic injections was increased. Of the two participants who received the high dose of vector, one had a transient, asymptomatic elevation of serum aminotransferase levels, which was associated with the detection of AAV8-capsid–specific T cells in the peripheral blood; the other had a slight increase in liver-enzyme levels, the cause of which was less clear. Each of these two participants received a short course of glucocorticoid therapy, which rapidly normalized aminotransferase levels and maintained FIX levels in the range of 3 to 11% of normal