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创新参选:RNA电泳如何得出漂亮的条带
【字体: 大 中 小 】 时间:2010年09月09日 来源:生物通
编辑推荐:
“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。目前活动已截止,评选结果将于9月15日公布。
“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。
目前生物通已经公布了一些项目,这些项目也倍受读者的关注。为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通将于2010年9月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名,送出世博会门票一张。目前活动已截止,评选结果将于9月15日公布。
福建医科大学的张小林就RNA电泳如何得出漂亮的条带,提出了几点建议。
背景:RNA电泳是分子生物实验中一个常用的实验方法,但RNase无处不在,所以常见的RNA电泳条带比较弥散,甚至检测不到,下面RNA电泳中的一些改进方法有助于你得到清晰可见的RNA条带。
方法改进:1.电泳槽、制胶器、梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——>自来水冲洗干净——>ddH20冲洗——>3%H2O2灌满浸泡过夜——>灭活的0.1%DEPC水冲洗干净——>超净台内紫外线照射过夜。 2.烧瓶、烧杯、药匙、量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干。或者ddH20清洗干净,超净台内紫外线照射过夜。 3.电泳缓冲液必须是RNase free(最好买试剂公司的)。 4.预电泳5-10min减少了非特异RNA条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电泳仪装置是否有误。 5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样时RNA的扩散、加样后RNA从齿槽逸出造成RNA的弥散及定位不良等现象。 6.电泳3-5min让RNA进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的RNA量及定位的准确性,从而有利于DNA的鉴定和纯化。
结果: