创新参选：染色质免疫沉淀的改进

“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。活动将于9月8日截止，请有意参赛者抓住最后的机会。

　　

“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。

目前生物通已经公布了一些项目，这些项目也倍受读者的关注。为了感谢这些分享实验技巧的参选者，生物通将于2010年9月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名，送出世博会门票一张。

河北医科大学的孙绍光对染色质免疫沉淀（ChIP）进行了一点改进。

背景：经典ChIP技术的主要操作流程包括：（1）甲醛处理使蛋白质与DNA交联；（2）超声波将染色质打断成一定大小；（3）通过抗体沉淀蛋白质－DNA交联复合体；（4）解除交联，用蛋白酶k消化，酚氯仿抽提纯化DNA；（5）PCR检测DNA。但实际操作过程中，经过第（4）步操作，DNA往往会大量丢失，最后造成PCR检测出现误差甚至错误。

方法改进：众所周知，在很多情况下进行PCR检测时，待检样本并不一定要进行核酸纯化，如菌落PCR等。而在进行ChIP时，经过免疫沉淀后，沉下来的是蛋白质和核酸的混合物。常规方法是经过抽提除去蛋白后，再进行PCR检测分析。但是此过程虽然是除去了蛋白，但同时损失了DNA，因此降低了PCR检测灵敏度，见图（上）。我们经过试验证明，在ChIP操作时，将第（4）步中的“用蛋白酶k消化，酚氯仿抽提纯化DNA”省略，直接沉淀加入适量的TE溶解后，进行PCR检测，不但节省试剂和时间，而且实验结果也得到很大改善，见图（下）。

结果：

活动9月8日截止，请尽快投稿！