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创新参选:流式细胞仪测定细胞周期的技巧
【字体: 大 中 小 】 时间:2010年07月06日 来源:生物通
编辑推荐:
“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通将于2010年7月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名,送出世博会门票或等值的礼品。
“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。
目前生物通已经公布了一些项目,这些项目也倍受读者的关注。为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通将于2010年7月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名,送出世博会门票或等值的礼品。
西安交通大学医学院的张殿增教授为我们带来了用流式细胞仪测定细胞周期的技巧。
参选项目:流式细胞仪测定细胞周期的技巧
背景:在测定细胞周期的时候,由于固定、消化等处理后会出现很多细胞碎片,影响测量结果,无法找到G1期细胞群。另外,在测定亚二倍体时,不是那么很清楚的显示出来。因此,根据自己多年来的操作经验,总结出了一些很好的测定技巧。
方法改进:
经验1.在测定细胞周期的时候(以BD公司的Calibur为例),除了设置好获取数据的模版外,另外设置以FL3为横坐标的直方图,测量模式为对数(log),调整放大倍数,使二倍体峰出现在横坐标10*3的位置,就很容易的找到了二倍体峰和细胞周期个时相细胞的分布情况。根据它再调节FL2(线性模式下)的放大 倍数,使二倍体峰在10*2的位置即可。
经验2.在测定细胞周期时,可以同时测定细胞凋亡。此时,也可以用上述办法,用FL3通道测定,再用modfit软件分析,结果是彩色图,很好看,也不影响细胞周期的分析。
结果:
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