创新参选：一种简易的快速PCR模板制备方法

“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。为了感谢这些分享实验技巧的参选者，生物通于2010年7月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名，送出世博会门票或等值的礼品。

　　

“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。

目前生物通已经公布了一些项目，这些项目也倍受读者的关注。为了感谢这些分享实验技巧的参选者，生物通于2010年7月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名，送出世博会门票或等值的礼品。获奖名单将于明日公布，敬请关注！

华东师范大学的张满仓为我们介绍了一种简易的快速PCR模板制备方法。

参选项目：一种简易的快速PCR模板制备方法

背景：用于PCR的模板有很多种，其中包括各种组织样品的基因组DNA，比如鼠尾组织和肿瘤组织。传统的方法是蛋白酶K消化后酚氯仿抽提，但步骤繁多实验周期较长，而且对于很多PCR检测，不需要得到纯度很高的DNA做模板。另一方面商品化的基因组快速抽提试剂盒价格又比较贵。

方法改进：我们在Truett的HotShot法基础上稍作修改。具体如下：碱裂解缓冲液包含25mM的NaOH和0.2mM的EDTA，中和缓存液包含40mM的Tris-HCL盐，两者放于4度备用，取2mm见方的组织（切记组织不可过多），放入0.2ml的PCR管或96孔板中，加入75uL的碱裂解缓冲液浸没组织，放入PCR仪上98度加热 30min后冷却至常温，漩涡震荡后加入75ul的中和缓存液，3000转离心3min（Eppendorf 5415D），置于4度保存，每个PCR取2uL作用上清液做模板即可。

结果：PCR结果与纯的基因组DNA做模板无明显差别，可用于大规模的快速检测，而且价格低廉。

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