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创新参选:利用嫩芽叶尖制片确认甜瓜染色体数目
【字体: 大 中 小 】 时间:2010年06月11日 来源:生物通
编辑推荐:
2010实验室创新技术大奖评选活动开展一个多月以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目。不看不知道,原来大家在实验中还有这么多小技巧,小创意。从今天开始,生物通将刊登参选项目,与读者分享。如果您的实验也有类似的改进或者从其它媒体处学习到一些改进,别犹豫,赶快参选,还有机会赢取世博会门票哦。
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西南大学园艺园林学院的易鼎杰同学向我们介绍了一种更快更好的甜瓜染色体计数方法。
参选项目:利用嫩芽叶尖制片确认甜瓜染色体数目
背景:甜瓜为藤蔓植物,染色体小,细胞质浓厚,过去一直是以根尖作为染色体计数的材料,随着甜瓜多倍体育种方法的多样化,根尖染色体计数已经不能满足于育种的需要,所以急需更快更好的染色体计数方法。
方法改进:本实验采用去壁—低渗火焰干燥法用甜瓜的幼嫩叶尖为材料,对甜瓜染色体进行计数。实现了材料易得,结果更好的目的。改方法还能用于对甜瓜茎蔓的倍性变化进行跟踪监测。
取样前一天,给甜瓜植株叶面喷足水,以刺激嫩芽旺盛生长,随机选取并标记22个嫩芽。上午8点左右,每个芽取1-2mm的嫩芽叶尖,用作实验材料。将叶尖置于敞口的Ep管中,室温下,用现配的0.002mol/L-1的8-羟基喹啉完全浸没材料,暗处放置2.5h、3.0h和3.5h,中间每隔一小时摇动一次Ep管。用卡诺固定液(甲醇和冰醋酸体积比3:1)固定1h以上。固定后,三级水冲洗3遍,用纤维素酶-果胶酶混合酶液处理叶尖2h、2.5h和3h。吸去酶液,用三级水浸泡0.5h。吸干水,加入卡诺固定液,放置1h后,涂片、火焰干燥。用Giemsa染色液扣染3-4min后,冲洗掉染液,电吹风吹干后进行镜检并摄像。实验过程大约8h,加上镜检所需时间,一天就能得到甜瓜的染色体数目鉴定结果。
结果:
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