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创新参选:哺乳动物细胞爬片免疫荧光染色中的小小改进
【字体: 大 中 小 】 时间:2010年06月17日 来源:生物通
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来自中科院的侯晓军对细胞爬片进行了小小的改进。
项目:哺乳动物细胞爬片免疫荧光染色中的小小改进
背景:在哺乳动物细胞研究中,常常要做细胞的免疫荧光染色。这就需要做细胞爬片。很麻烦的是,要么细胞在玻片上长的效果不好,都长在周围;要么会长的玻片两面都有,非常影响后期的染色和观察。
方法改进:后来我想,我们常常先把明胶铺在培养皿上,以使细胞生长的更均匀,贴壁更好;于是在做细胞爬片的时候,我也采取了类似的方法。 1.处理玻片:先清洗,晾干后泡酸;再清洗,用纯酒精浸泡;晾干,用钻石笔或其他方法切成适当大小(按你用的培养皿比一下),121C,高压灭菌。或者直接购买无菌玻片,方便,但费钱。 2.无菌条件下,把处理好的玻片放入4孔板(比较合适,后面用很方便),加上1%的明胶。孵育5分钟,用吸管吸去,风干15分钟后,接种细胞,细胞长的很均匀,而且不会到玻片下面了。 3.细胞长到适当浓度后,吸去培养液,此时不要急于取出爬片,直接在四孔板中继续后续步骤。用PBS清洗后,固定,孵育等等,非常方便。直到最后需要贴到载玻片上再取出,此时记住,一定要把细胞染色的一面朝下,成功了。
结果:做了很多次,效果都很好。
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