创新参选:激光共聚焦染色方法的改进

【字体: 时间:2010年06月02日 来源:生物通

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苏州大学的马守宝对激光共聚焦染色方法进行了改进。

参选项目:激光共聚焦染色方法的改进

背景:在做激光共聚焦(Confocal)的时候经常会进行多种染色处理,比如用Dapi染细胞核,用Lyso-Tracker Red 染溶酶体,这样通过叠加就可以看到所研究的药物或其他荧光标记的分子在细胞内的分布情况。一般情况下细胞核和溶酶体同时染色的顺序是:用Lyso-Tracker Red 染溶酶体-PBS漂洗-细胞固定-PBS漂洗-Dapi染细胞核-PBS漂洗-上机检测,但是按此顺序操作会发现只有蓝色荧光(细胞核),红色荧光(溶酶体)不可见。因此不能同时观察细胞核和溶酶体。

方法改进:改进之处在于染色顺序的微调,即:细胞固定-PBS漂洗-Dapi染细胞核-PBS漂洗-Lyso-Tracker Red 染溶酶体-PBS漂洗-上机检测。

结果:

注:蓝色为细胞核,红色为溶酶体,绿色为聚合物。从图中可见细胞核和溶酶体均可见。

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