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Phase Lock Gel™ - 酚氯仿抽提核酸的最佳伴侣[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2010年12月17日 来源:生物通
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为了解决酚氯仿抽提核酸中的一系列问题,天根(Tiangen)公司推出了一款独特的产品——Phase Lock Gel™ (PLG)。PLG就像一把锁,紧紧锁住了可能污染核酸的杂质,也就最大限度地释放了样品中的核酸。研究表明,与传统方法相比,核酸得率可提高30%。
对于核酸纯化,有些研究人员还是热衷于使用酚/氯仿抽提。然而,在实验过程中,除了要忍受刺鼻的气味外,还需要面对实验结果的不稳定。为避免将蛋白杂质或有机相连同上清一起吸出,我们往往会弃去一部分上清,这样会造成相当一部分样品损失,特别是小体积的酚抽提,而且不同样品无法标准化操作。反之,如果不小心混入了有机相,又会对下游实验产生抑制作用。
为了解决这一系列问题,天根(Tiangen)公司推出了一款独特的产品——Phase Lock Gel™ (PLG)。有了这款产品后,您再也不用担心吸多了或吸少了。只需将酚氯仿和样品的混合物加入预装有PLG的管子里,离心,这种专利的化合物就会在水相和有机相之间形成一层致密的固体,将中间层的蛋白杂质和下层有机相完全锁在固体之下,这样,全部水相样品可轻松吸出,完全不用担心混入杂质,也不用担心酚氯仿会不小心流出来。对于大体积的样品抽提,还可以直接将全部水相倒出而有机相依然被牢牢“锁定”在管底不会流出。
PLG就像一把锁,紧紧锁住了可能污染核酸的杂质,也就最大限度地释放了样品中的核酸。研究表明,与传统方法相比,核酸得率可提高30%。研究人员再也无需战战兢兢地移液,同时也避免了有毒化合物的危害。PLG适合于任何需要酚、酚/氯仿提取水相的方法。
针对不同应用,PLG有heavy(H)和light(L)两种密度可供选择。前者适用于碱法提质粒、RNA抽提等杂质较多(粘稠)的情况(不适合纯酚抽提),后者适用于酶切反应、cDNA合成、标记反应和常规组织的基因组DNA纯化(mouse tail除外),适合纯酚、酚氯仿、氯仿抽提。
如何选择Phase Lock Gel™?请查看表1和表2。
表1. 快速应用指南
PLG Heavy |
鼠尾基因组DNA提取 采用标准的蛋白酶K/SDS有机溶剂提取鼠尾基因组DNA |
质粒DNA抽提 采用碱裂解/酚抽提法 | |
总RNA提取 改良的异硫氰酸胍/酸酚法提取组织和细胞中的RNA | |
PLG Light |
基因组DNA提取 蛋白酶K/SDS方法提取基因组DNA |
琼脂糖凝胶凝胶回收 采用酚抽提法从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 | |
噬菌体或M13 DNA提取 标准纯化方法进行细菌DNA的分离 |
表2. Phase Lock Gel Heavy和Light的应用及兼容性
水相 |
有机相 | |||
|
酚/氯仿/异戊醇(25:24:1) |
氯仿/异戊醇 (24:1) |
水或缓冲液饱和的氯仿/异戊醇(24:1) |
水或缓冲液饱和的酚 |
< |
L, H |
L, H |
L, H |
L |
< 1 mg/ml BSA |
L, H |
L, H |
L, H |
L |
质粒DNA提取 |
H |
H |
H |
X |
组织匀浆基因组DNA提取 |
L, H |
L, H |
L, H |
L |
RNA提取 |
H |
H |
H |
X |
此外,PLG还有一个好处,它是惰性的,不受任何标准的核酸限制性酶和修饰酶的影响。您可以直接在装有Phase Lock Gel的管子里进行酶切,加热失活,再加入酚或酚氯仿抽提。常用的限制性酶(如EcoR I、Hind III等)和修饰酶(如逆转录酶、T4 DNA聚合酶、T4 DNA连接酶)反应都曾在含有PLG的管中成功进行。
Phase Lock Gel有以下几种规格,您可以按照样品体积选择最合适的。至于PLG的报价或说明书,请点击此处索取。
离心管大小 |
样品体积 |
1.5 ml |
100-500 µl |
2 ml |
100-750 µl |
15 ml |
1-6 ml |
50 ml |
5-20 ml |
P.S. 需要特别提醒的是,PLG必须保存在室温,千万不要冷冻!
天根的免费技术咨询热线:800-990-6057
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