全新的干细胞培养表面，无需滋养层[新品推荐]

赛默飞世尔科技近日推出了一款全新的干细胞培养表面。这种独特的聚苯乙烯表面能让人胚胎干细胞（ESC）和诱导多能干细胞（iPSC）直接粘附，形成克隆和生长，而无需滋养层细胞或基质包被。经验证，用添加了Rho相关激酶（ROCK）抑制剂的培养基培养的hESC可在Nunclon Vita表面上培养至少10代，而不会丧失多能性，或核型发生改变。

赛默飞世尔科技近日在德国汉诺威举办的国际生物技术展（Biotechnica 2010）上推出了一款全新的干细胞培养表面- Thermo Scientific Nunclon Vita stem cell culture surface。这种独特的聚苯乙烯表面能让人胚胎干细胞（ESC）和诱导多能干细胞（iPSC）直接粘附，形成克隆和生长，而无需滋养层细胞或基质包被。

经验证，用添加了Rho相关激酶（ROCK）抑制剂的培养基培养的hESC可在Nunclon Vita表面上培养至少10代，而不会丧失多能性，或核型发生改变。因此，Nunclon Vita让干细胞科学家又向前迈出了重要一步，能对干细胞的培养进行更好的控制，并为下游应用提供了更稳定的细胞供应。

在干细胞培养中排除了基质包被和滋养层细胞，也就意味着实验可变性减少。与那些需要基质包被和滋养层细胞的操作相比，Nunclon Vita表面耗费的劳力显然更少。对于扩展的细胞扩增，Nunclon Vita表面更易适应，因为细胞在聚苯乙烯表面上直接生长。此外，这种表面与ROCK抑制剂协同作用，在扩增hESC、iPSC和人胚肾细胞（HEK）时，能实现胰酶传代或机械传代。

hESC在Nunclon Vita表面上传了11代后，仍表达了多能性标志物CD9、OCT4、SSEA4和SOX2。如下图所示，通过免疫荧光染色确定hESC中多能性标志物的表达。

Nunclon Vita表面也很好地支持了HEK293的粘附和生长，比标准的TC处理表面更好。在培养基中添加ROCK抑制剂Y-27632，能增强HEK293在Nunclon Vita表面的粘附和生长。

对于人诱导多能干细胞，目前已扩增超过3代，且维持了多能性，不过还需要更多研究以了解全部的性能。

赛默飞世尔科技一直致力于开发新型的细胞培养表面。去年，它就曾推出两款革命性的干细胞培养新表面 – HydroCell和UpCell。

NUNC HydroCell表面为一种具有更低蛋白吸附和更低细胞吸附的新型细胞培养表面，适合悬浮细胞的单细胞培养和细胞簇培养。Nunc HydroCell产品表面是一层特殊的共价-固相、超级亲水性聚合物薄层，特殊设计旨在防止悬浮细胞对培养表面的非特异性贴附。某些敏感的悬浮细胞可能在培养过程中受到不必要的激活及分化信号刺激而产生不必要的贴壁现象。此外，Nunc HydroCell表面对细胞培养基中的蛋白成分（包括培养时细胞分泌的蛋白）的吸附性也是极低的。使用Nunc HydroCell表面产品可以得到更均一化的悬浮细胞培养，可保证悬浮细胞的非贴壁状态，得到更高的细胞产率及细胞分泌蛋白产率，包括涉及单核细胞/巨噬细胞及多种干细胞的细胞培养技术。

NUNC UpCell表面为一种温度诱导性收获单个细胞和组织工程细胞的新型细胞培养表面。该表面是一层特殊的均一的共价-固相poly-NIPAAm或poly-PIPAAm多聚物薄层。环境温度37ºC时该表面为轻度疏水性，适合细胞的贴附和生长，而在低于32ºC时该表面为转变为亲水性，表面将结合水分子并膨胀，从而将贴壁的细胞连同细胞下层细胞外基质（ECM）一同释放出来。被完整保留的细胞下层ECM确保收获到的连续细胞层具有完整的细胞极性、细胞-细胞连接、细胞层-细胞层间立体连接，以及细胞层与移植点之间的连接（无需纤维蛋白胶或缝合）。特殊设计使贴壁细胞在温度变化条件下快速从UpCell培养表面脱落。避免了使用酶法（胰酶）和细胞刮刀分离贴壁细胞对细胞的伤害，从而保持了细胞的活性和细胞表面受体及抗原的完整性。即使是其他方法非常难以分离的贴壁细胞类型和连续细胞层也可以从Nunc UpCell表面轻松脱落分离，并且从Nunc UpCell 表面收获的细胞层可以叠放培养，从而在无需支架和外源性材料的条件下就能建立三维组织模型和共培养，大大简化了细胞培养和组织工程技术。

如需索取Nunclon Vita表面的详细技术资料，请点击这里。（生物通 余亮）