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著名实验室推荐:全血RNA提取[心得点评]
【字体: 大 中 小 】 时间:2009年05月15日 来源:百泰克公司
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RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了,但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法,或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来,加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,如果能进行全血的提取,那就再好不过。
RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了,但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法,或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来,加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,如果能进行全血的提取,那就再好不过。
目前有一些公司已经生产了相关试剂,可以从全血中直接提取RNA,来自中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物医学实验室,以及博奥生物芯片北京国家工程研究中心的科研人员推荐了北京百泰克生物公司的RNA全血提取试剂盒。
更多详细资料>> >> 博奥生物芯片北京国家工程研究中心:
我们比较了不同公司的产品后,认为北京百泰克生物公司生产的TRI pure LS Reagent用于全血有核细胞的RNA抽提效果较好,可以满足基因表达谱芯片的分析要求。一般1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。
在临床上采血时,可以先把TRI pure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个月,-80℃可达半年。在此期间,可以把该裂解液运输到博奥生物公司进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。
全血样品溶解在TRI pure LS Reagent试剂后的状态:
RNA电泳图:
图1 泳道1与2,在-80度保存一个月后的提取结果。第M泳道:标准的Hela细胞RNA
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所:
百泰克公司的血液(液体样品)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)产品,在提取组织病料中细胞总RNA时,发现较本实验常用的提取方法在总RNA量和提取时间上(节约了三分之一的时间)都得到的了优化,且价格优惠,是性价比较高产品。下图是提取完后RNA凝胶电泳的比较结果(图中2为血液(液体样品)总RNA快速提取试剂盒的结果)。