如何检测猪流感？

面对来势汹汹的猪流感，如何快速准确地检测已成为各国CDC目前最关心的问题。实时定量RT-PCR显然已经成为大家公认的选择。美国FDA已经紧急授权了一种定量试剂盒用于猪流感病例的鉴定。世界卫生组织也公布了用实时定量RT-PCR来检测猪流感的CDC操作步骤。

　　

面对来势汹汹的猪流感，如何快速准确地检测已成为各国CDC目前最关心的问题。显然，连最权威的美国FDA也有点措手不及。27日，FDA发布紧急授权令，允许一种尚未批准的实时定量RT-PCR试剂盒（rRT-PCR Swine Flu Panel）用于猪流感病例的鉴定。FDA并没有说明此试剂盒是由CDC内部开发的，还是由某个厂家制造的。

尽管好几个分子诊断制造商发表声明称，他们的产品能够检测猪流感，但迄今为止都没有获得FDA的授权。

经过进一步证实，FDA授权的实时定量PCR分析是利用TaqMan探针在ABI的7500 Fast Dx或7500 Fast实时定量PCR仪上进行的，后者只能用于科研。生命科技公司的首席运营官Mark Stevenson表示，他们已经运送了几台7500 Fast和7500 Fast Dx实时定量PCR仪到美国的几家政府机构，用于检测流感病毒株，同时他们也在验证流感试剂盒，以确保它能够鉴定这种致命的新毒株。

Stevenson还表示他们接到了许多来自其他国家的订单。比如重灾区墨西哥已经订购了10台Fast Dx实时定量PCR仪。同时，其他国家的不少临床实验室也在直接联系生命科技公司。Stevenson并没有指明由于这次的猪流感公司卖出了多少台仪器，但他表示新加坡的制造基地正在扩大生产，以满足仪器的需求。

日前，世界卫生组织也公布了用实时定量RT-PCR来检测猪流感的CDC操作步骤。它利用了一组引物和双标记水解探针（Taqman）来体外检测和鉴定猪流感病毒。其中，InfA引物和探针组是通用检测A型流感病毒，swInfA引物和探针组是特异检测所有猪流感A病毒，swH1引物和探针组是特异检测猪H1流感病毒。此操作步骤可在WHO的网站上下载。

目前国内尚无猪流感的病毒样本，而引物、探针、血清、抗原等流行病学信息，中国CDC也仍未获得。因此，中国CDC已与美国CDC联系共享资源，开始根据美国公布的全基因序列自行合成H1N1全基因序列，并设计检测引物。下一步，中国CDC将优化检测技术，下发引物等检测试剂，对既往分离猪流感病毒进行全基因测序和比对分析，并开展人群猪流感病毒感染状况血清学调查。

猪流感检测步骤与禽流感相似，可参考《如何检测禽流感》。

（生物通 余亮）