中国RNAi技术等登Nature研究亮点

　　

生物通报道：本期Nature研究亮点生物类主要包括miRNA检测，钙调蛋白和热激蛋白各方面的研究成果。

第一篇由来自河北大学药物化学与分子诊断学教育部重点实验室的研究人员完成，文章通讯作者是李正平博士，这项研究得到了国家自然科学基金(20675023)，新世纪优秀人才支持计划(NCET-05-0258), 高等学校博士学科点专项科研基金 (20070075003)等的资助。

文章主要利用引导和分支滚环扩增法高灵敏度检测miRNA，其中分支滚环扩增法是指在恒温(60～65℃)条件下，30～60min内将只有几个拷贝的靶核酸扩增到109水平。这一方法一大特色是，可以通过反应副产物——白色焦磷酸镁沉淀的产生与否来判断靶基因的存在，其原理是采用四条特异引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶在65℃左右对核酸进行扩增，短时间扩增效率可达到109-1010个拷贝。

第二篇文章发表在JBC上，由中科院植物研究所分子发育生物学研究中心的首席研究员林金星博士领导完成，主要围绕钙调蛋白进行。钙调蛋白CaM是一种高保守性的细胞内钙离子感应器。在植物中，CaM也作为一个多肽信号因子影响许多生理功能。但是其在细胞质外结合的位点至今并不清楚。

在这篇文章中，研究人员在植物细胞表面利用CaM交联QD系统进行单分子水平检测，发现QD－CaM能选择性的结合在质膜外空间，并且通过高分辨率透射电子显微镜进行了进一步定位。

第三篇文章由清华大学生物膜及膜生物工程国家重点实验室完成，研究人员发现DegP蛋白能通过在类脂膜上的聚集使其在两种功能间转换，从而具备两种调控作用：在常温下( 25 °C)，作为分子伴侣帮助其他蛋白的正确折叠；而在高温时(37–45 °C)，作为蛋白酶高效降解未折叠或变性蛋白。

（生物通：万纹）

附：

李正平，男，理学博士，教授，博士生导师。1999年毕业于北京大学化学与分子工程学院，获博士学位；2000-2002年在日本日立中央研究所从事博士后研究；现任化学与环境科学学院副院长。主要从事分子发光与生化分析：应用荧光、化学发光、共振光散射研究蛋白质、核酸分析。

主讲课程：
现代仪器分析，分子光谱分析、分子探针与生化分析。

主要科研项目：
以纳米粒子为探针的高灵敏度分子诊断分析研究（NCET-05-0258），教育部新世纪优秀人才支持计划。

以纳米粒子为化学发光探针的高灵敏度分子诊断分析研究（20675023），国家自然科学基金。

利用化学发光在基因水平上分析检测食品中病原菌（20375011），国家自然科学基金。

快速、高灵敏度生物发光基因诊断技术研究(205020)，教育部重点项目。

以纳米粒子为探针的共振光散射高灵敏度均相分子诊断分析研究(B2006000967)，河北省自然科学基金。

免疫、基因分析中的纳米粒子化学发光探针研究（203111），河北省自然科学基金。

化学发光分析DNA单碱基多态性的研究，教育部留学回国基金。用化学发光在基因水平上分析检测食品中病原菌（20375011）

原文摘要：

Cheng, Y. et al. Highly sensitive determination of microRNA using target-primed and branched rolling-circle amplification. Angew. Chem. Int. Ed. doi:10.1002/anie.200805665 (2009).

Wang, Q. et al. Calmodulin binds to extracellular sites on the plasma membrane of plant cells and elicits a rise in intracellular calcium concentration. J. Biol. Chem. doi:10.1074/jbc.M808028200 (2009).

Shen, Q. T. et al. Bowl-shaped oligomeric structures on membranes as DegP's new functional forms in protein quality control. Proc. Natl Acad. Sci. USA doi:10.1073/pnas.0811780106 (2009).