十大创新产品之Criterion无染料凝胶成像系统

　　

是不是已经厌倦了甲醇那刺鼻的气味，还有考马斯蓝那一旦沾上就怎么也洗不掉的蓝色？最最恼人的是，多么美好的青春岁月却都花在染色和脱色上，脱不开身，连讲座都没办法去听。时间还要控制好，太短则染色不够，太长又怕脱色过了头。现在，你终于有机会和这一切说拜拜了。Bio-Rad公司在今年10月份推出了Criterion Stain Free gel imaging system，完全不需要染料，就能得到蛋白电泳的图像，实现蛋白的检测和定量。

你的第一反应肯定是：why？它的原理是什么？Criterion Stain Free技术源于2002年发表在《Analytical Biochemistry》上的一篇文章。文中指出聚丙烯酰胺中的蛋白可以进行快速检测。方法是将蛋白胶浸泡在三氯乙酸或氯仿中，然后通过紫外光照射。在三氯化合物存在时，紫外光会驱使色氨酸发生反应，产物会发出可见区内的光，从而实现蛋白条带在胶上的定位。Bio-Rad公司利用了这项技术，并进行了一定的改进，开发出这套无染料凝胶成像系统。

Criterion Stain Free gel imaging system的主要部件有两个：Criterion预制胶，Criterion无染料成像仪。当然，为了分析结果，你还需要电脑和软件。Criterion预制胶与普通的预制胶可不同，估计是含有三氯化合物，所以不能拿平时用的预制胶来代替。样品制备及电泳步骤与普通的电泳一样。电泳之后，取出凝胶，放置在Criterion 无染料成像仪中。分离的蛋白通过UV照射而激活，产生荧光，从而被CCD照相机捕获。2.5-5分钟后，蛋白的图像就出来了，软件还会根据蛋白Marker，自动估算每个蛋白条带的分子量和数量，超级省心。

你看，完全用不着染料，也不需要等待，电泳完几分钟图像就出来了。现在体会到科学技术是第一生产力了吧。生物通总结了Criterion Stain Free gel imaging system的特点，可以用一个单词概括——FROGS，这可不是青蛙哦。

F (Fast)——快速

这个自不必说，与一般的考马斯蓝染色相比，起码省了两个小时。平常染色1小时，脱色半小时，还要洗啊、拍照、分析，怎么也得2个多小时吧。现在可好，5分钟就搞定了，连分析都替你包办了，直接出来一张分析报告，包括凝胶图像、分子量和纯度分析。而且系统中用的是预制胶，最烦人的配胶、等胶的时间也省了，即开即用。在快毕业或急着发文章的时候，这一点尤其重要。

R (Reproducible)——重复性好

有时候染色、脱色的时间不同，产生的胶图也会相去甚远。这里多一条带，那里少一条带，没办法进行比较。Criterion就不同，分析标准化，数据之间容易进行比较。另外一点还是要归功于预制胶。预制胶虽然贵点，可还是贵的有道理。毕竟是工业化生产的，跟我们手工配制的就是不一样，而且有时候试剂放太久了，配出来的胶其实就是不合格的，结果当然不会漂亮。

O (One-touch)——一键式操作

Criterion无染料成像仪长得有点像电脑主机，上面有一个大大的按钮，就像开机键一样。一摁，就开始自动的蛋白照相和数据分析，非常方便。而且软件通过与蛋白Marker的比对，获得的分析结果可比我们目测和估算准确多了。

G (Green)——环保

整个过程中，你再也无需和有毒的试剂如丙烯酰胺、甲醇等打交道，也不会产生有机污染物，更加环保。现在不都提倡这个嘛。大街上每个人都背着环保袋，上面写着绿色生活什么的。

S (Sensitive)——灵敏

我想大家最关心的还是灵敏度。如果灵敏度太低，再简便省时也是白搭。事实证明，Criterion Stain Free system的灵敏度与考马斯蓝染料相同或更高。而通过对一系列蛋白标准品进行LOD（检测极限）和LOQ（定量极限）分析，两者的数据也是相当，具体的分析步骤和结果请查看Bio-Rad公司的技术札记（Bulletin_5782）。

看到这里，总算明白FROGS的含义了吧。从2小时到2.5分钟，Criterion Stain Free系统彻底颠覆了传统的蛋白凝胶分析流程，让我们更轻松地获得更准确的结果。这也就是它入选生物通“2008生命科学十大创新产品评选”的最主要原因。

（生物通 余亮）