Raf激酶研究新进展

生物通报道：北卡罗莱那大学、加州大学和奥地利维也纳生物中心的研究人员设计出神经组织中含有条件性Braf和Raf1空等位基因的基因工程小鼠，这些小鼠能够存活到成年，可用来研究成体小鼠神经元中Raf激酶和下游途径成分。详细内容刊登于3月29日《Nature Neuroscience》。

　　

生物通报道：神经组织的Braf或者Raf1被条件敲除（conditional deletion，生物通编者译）的小鼠能够活到成年，为研究人员研究成体神经元中B-Raf和C-Raf信号传递提供了可能。

Raf激酶是丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）信号传递的关键调节者，在神经发育中扮演重要角色。神经生长因子（Nerve growth factor ，NGF）刺激的神经元轴突生长是由Raf-MEK-Erk途径介导的，有活性的Ras或c-Raf的过表达对无Braf和Raf1的小鼠有胚胎致死性。

北卡罗莱那大学、加州大学和奥地利维也纳生物中心的研究人员设计出神经组织中含有条件性Braf和Raf1空等位基因的基因工程小鼠，这些小鼠能够存活到成年，可用来研究成体小鼠神经元中Raf激酶和下游途径成分。详细内容刊登于3月29日《Nature Neuroscience》。

研究人员对小鼠背根神经节（dorsal root ganglion ）、脊髓和大脑中的Braf和Raf1等位基因进行单敲除或共敲除。结果显示，Raf1单敲除的小鼠与野生型小鼠无明显差异，Braf单敲除的小鼠最多能够生存一个月并且生长严重受阻。在Braf条件敲除的四周龄小鼠的神经组织中，phospho-Erk1/2和神经胶质细胞来源的神经营养因子受体Ret水平明显偏低，phospho-MEK1/2和NGF受体TrkA只是稍微下降。相反，无Braf的胚胎的神经组织中，phospho-Erk2水平正常，无TrkA。Braf和Raf1条件性敲除导致胚胎由于轴突生长和分叉异常而死亡。背根神经节中两个基因双突变，Ret和TrkA水平正常，Eek1/2磷酸化水平明显下降。有趣的是，Mek1/2磷酸化水平只略微下降。

研究人员还鉴别出一个由CBF-β和Runx1组成的转录因子复合体，对B-Raf和NEG信号传递引起的Ret表达和上调非常重要。值得注意的是，Runx转录因子据认为与出生后神经分化有关。

这些发现提示神经发育过程中Raf激酶功能的关键差异。Raf1条件性敲除的小鼠能够幸存下来，说明B-Raf不是神经形成和神经元生存所必需的。同样，Raf双突变的胚胎致死性说明胚胎发育时（非出生后神经发育），Raf激酶在神经组织中有重复或者互补功能。Braf敲除和条件性不含Braf、 Raf1的小鼠之间，phospho-Erk 和 phospho-MEK中的差异为进一步研究处于发育过程的神经元的Raf信号传递细微差异提供了参考点。

Original Reference:
Jian Zhong, Xiaoyan Li, Cara McNamee, Adele P Chen, Manuela Baccarini & William D Snider.
Raf kinase signaling functions in sensory neuron differentiation and axon growth in vivo.
Nature Neuroscience Published online: 29 March 2007
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http://www.nature.com/neuro/journal/vaop/ncurrent/full/nn1898.html