国家重大科技专项:PCR检测技术获重要进展

【字体: 时间:2006年01月18日 来源:生物通

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生物通综合: 2001年7月国家科技部启动实施了12个重大科技专项。目前,12个重大科技专项工作进展顺利,取得了一批重要的阶段性成果。

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在这12项重大科技专项中,近期“食品安全关键技术”课题中的“动物组织中猪瘟病毒和伪狂犬病病毒荧光定量PCR检测技术”研究(由武汉大学病毒学国家重点实验室承担)取得重要进展。

武汉大学病毒学国家重点实验室是于2005年4月由国家科技部批准筹建的国家级别的重点实验室,这一实验室拥有三级生物安全实验室、动物三级安全实验室、中国典型培养物保藏中心、中国病毒资源与信息中心和SPF级实验动物中心、艾滋病中心等中国内地一流条件和技术平台,并在筹建四级生物安全实验室和艾滋病医疗中心,拥有中国唯一的病毒学专业、微生物学国家重点学科,由著名病毒学家田波、桂希恩等专家领衔。(探访国家实验室:武汉大学病毒学3年之役 

在“动物组织中猪瘟病毒和伪狂犬病病毒荧光定量PCR检测技术”这一课题中,实验室研究人员采用了数据库序列搜索和同源性分析,选取相应的靶序列,设计出PCR引物和探针,经实验优化、验证和重复实验,建立了猪瘟病毒和伪狂犬病毒荧光定量的PCR检测技术,进行了方法的特异性、敏感性和重复性实验评价。该方法定量检测的线性范围为101-108拷贝病毒核酸分子,最小检测限为10拷贝。

与传统病毒检测方法对比研究证实,荧光定量PCR检测技术比传统的病毒分离和生物学试验、电镜观察、免疫荧光技术、补体结合试验、核酸杂交和聚丙烯酰胺凝胶电泳等检测方法的灵敏度提高了2至3个数量级,重复性检测的变异系数CV小于5%。荧光定量PCR检测技术具有耗时短、步骤简单、高通量和定量检测病毒等特点,适用于动物组织中猪瘟病毒和伪狂犬病毒的快速定量检测,实现病毒检测技术的定量化、标准化和科学化。

该检测技术目前已获得国家发明专利1项,申报国家发明专利1项。
(生物通记者:张迪)

 

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