■QIAgenes 预制蛋白表达载体 
QIAgene 预制蛋白表达载体（QIAgene Expression Kit）是QIAGENE和GENEART合作推出，专门针对35，000个人类基因所设计，目的在于解决人类蛋白表达瓶颈难题。为优化E.coli中人类蛋白表达所设计。采用最权威的Gene Optimizer™ 软件，对DNA序列进行以下方面优化：消除稀有密码子而利用最佳密码子，调整编码序列GC含量, 最小化mRNA二级结构影响，避免重复序列和内部核糖体结合位点影响化等。
经优化后的全长cDNA序列克隆到表达载体，进一步经过序列验证，以确保序列的正确性。确保优化序列在E.coli体内或体外，昆虫细胞（Coming soon），哺乳动物细胞（Coming soon）体系中高效表达。
QIAgene 预制蛋白表达载体提供整套解决方案，包括QIAgenes Expression Construct E. coli, positive control, Penta·His Antibody以及Ni-NTA Spin Columns.
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■QIAgenes 表达载体结构
◇含有T7启动子，可直接在BL21（DE3）等菌株或利用
无细胞系统进行表达（如EasyXpress E. coli-based kits）
◇N端带有6×His标签，在Ni-NTA上进行一步亲和纯化，
利用TAGZyme™ 可去除6×His标签
◇可表达无标签蛋白，利用Nde I酶切，再连接去除His标签
◇C端内置琥珀终止密码子，可利用EasyXpress Site-Specific
Biotin Kit进行生物素标记
◇卡那霉素抗性用于筛选 |
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■QIAgene表达载体有效提高蛋白产量
对表1中100种DNA序列优化前后的表达结果进行比较，结果表明，使用QIAgene大于 90% 的蛋白被成功表达(膜蛋白占60%) ，产量比未经优化序列提高50倍。且无论在E. coli 体内，体外系统中均能得到最优表达(图2):
■利用Ni-NTA纯化QIAgene蛋白
QIAgenes表达载体N端带有His标签，可以利用Ni-NTA一步纯化得到高纯度蛋白。如果试验需要得到无标签蛋白，His标签可以利用TAGZyme system去除（图3）。 |
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■ QIAgene 表达载体订购
QIAgene的订购也非常方便，点击www.qiagen.com/PG/GeneGlobe/Default.aspx，选择所需基因即可。省去了传统流程中的文库筛选，PCR扩增，亚克隆，克隆筛选，测序等繁琐步骤（见以下流程图）。根据基因片段大小，价格也不同。在2008.6.1号至9.30号期间购买该产品，可获得7折优惠，详情请咨询QIAGEN China 销售员或指定代理商！
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■QIAgene蛋白领域应用:
◇功能分析 ◇结构分析 ◇相互作用检测
订购信息：
产品 |
规格 |
货号 |
QIAgenes Expression Kit |
QIAgenes Expression Construct E. coli, positive control, Penta·His Antibody, 4 Ni-NTA Spin Columns |
Varies |
EasyXpress Protein Synthesis Kit (5) |
For 5 x 50 μl reactions: E. coli extract, buffers and reagent s |
32501 |
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