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膜过滤技术的使用指南
【字体: 大 中 小 】 时间:2014年04月10日 来源:生物通
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对微生物进行准确可靠的检测和鉴定,对于公共安全和工业经济都至为重要。上世纪五十年代引入的膜过滤技术,可以替代最大或然数法(MPN),对水样进行微生物分析。与MPN不同的是,膜过滤技术可分离到离散的菌落,从而进行准确的计数。
众所周知,微生物污染不仅会诱发严重的疾病,还可能导致药品停产、食物变质、饮料变味、计算机芯片异常等不良后果。因此,对微生物进行准确可靠的检测和鉴定,对于公共安全和工业经济都至为重要。
上世纪五十年代引入的膜过滤技术,可以替代最大或然数法(MPN),对水样进行微生物分析。与MPN不同的是,膜过滤技术可分离到离散的菌落,从而进行准确的计数。
目前,膜过滤技术已经成为了一项全球公认的有效方法,可以帮助人们分析水溶液中的微生物或颗粒污染。经美国环境保护组织(美国EPA)、美国药典、欧洲药典、日本药典和其他类似机构核准,该项技术可用于过滤饮用水中的全大肠杆菌和粪便大肠菌。此外,膜过滤技术还应用在众多的工业领域,进行培养微生物计数、真菌(酵母和霉)计数、和特定生物体隔离。
简单的步骤
膜过滤系统由滤膜、过滤漏斗和真空系统组成。当液体样品通过滤膜时,其中的微生物就会被截留在膜的表面。之后可以将滤膜放在装有培养基的平皿中,此时培养基的营养物质能穿过滤膜,帮助微生物在膜表面生长并形成菌落。
膜过滤技术的优势
MPN法、倾注平板法和螺旋平板法,都是微生物检测中常用的传统方法,我国国标用得较多的是MPN法和倾注平板法。与这些方法相比,膜过滤技术的主要优势在于,可以对量大的样品进行浓缩。许多工业和环境微生物分析都需要100ml以上的样本量,而倾注平板法的样本量只有2ml,螺旋平板法的样本量只有0.5ml。
膜过滤技术不仅能够分离和计数非连续的菌落,其准备时间也比许多传统方法短,可以在24小时之内提供有关信息。更重要的是,这一技术能够滤除抑制性或杀生物的试剂,这是倾注平板法和螺旋平板法无法企及的。
膜过滤技术的应用
总得来说膜过滤技术是一种公认的有效技术,可以检测液体样本中的微生物污染情况。该技术可以对饮用水、污水和地表水进行质量监控,帮助制药和化妆品行业检测水中的假单胞菌,还可以在电子工业、食品和饮料行业控制微生物污染。
膜过滤技术的工作系统
真空泵VS蠕动泵
一般膜过滤使用的真空泵需要配备抽滤瓶。而蠕动泵无需抽滤瓶,也就不用担心瓶子是否会发生破裂。此外,普通真空泵在使用过程中,有时会因为样品回流造成污染。但蠕动泵在过滤样品时,可以保证液体单向流动,避免了这样的风险。
Pall公司的Sentino微生物检测一体泵,是一个设计紧凑的小型蠕动泵,其长宽高仅为13.6cm×9.5cm×10.4cm,在高度受限的工作台里也能够操作自如。该仪器采用可抛型的软管,不仅使用方便,而且可以在最大程度上避免污染,其支架也不需要清洗包裹和灭菌。
Sentino微生物检测一体泵采用符合U.S.EPA、ISO和ASTM要求的固定化参数,可以避免因参数改动对细菌生长产生影响。这是一款便捷的按键式操作仪器,清洗和日常维护都非常简单。
如何选择过滤漏斗
在选择过滤漏斗时,我们主要考虑三个因素:结构材质、样品体积和灭菌要求。
结构材质
在需要高压灭菌的情况下,我们一般选择塑料漏斗。塑料漏斗比不锈钢漏斗便宜,又比玻璃漏斗耐用,不仅操作方便,而且能兼容许多实验室常用的化学物质。
为了进一步提高实验效率,防止样品发生交叉污染,Pall公司推出了塑料的MicroFunnel一次性过滤漏斗。只需要简单挤压,就可以使漏斗与底座分离,轻松取出膜片。这些漏斗经过了厂家的伽玛射线灭菌,而且都是独立包装,即刻可用。在即将下班灭菌锅已经关闭的情况下,这种产品是非常实用的。
MicroFunnel一次性过滤漏斗允许你根据自己的需要,选配合适孔径的滤膜。该产品还可以直接连接标准实验室支架歧管,最适合对制药生产中的水相流体进行质量控制和分析。据介绍,MicroFunnel Plus过滤漏斗是市面上仅有的一款,集样品杯和过滤漏斗于一身的一次性过滤漏斗。这种漏斗大大简化了操作步骤,进一步保护了样品的完整性,还可以从90度高温的系统中采集水样。而MicroFunnel ST过滤漏斗,非常便于在隔离环境内进行无菌测试,达到了美国药典现行版中的所有要求。
除了MicroFunnel一次性过滤漏斗之外,Pall公司还有一款47mm磁性过滤漏斗。这种漏斗的聚苯砜结构,能够兼容防起沫试剂和其他很多溶剂。其独特的磁性密封设计,便于单手进行液体的真空过滤。这种磁性漏斗不仅耐用安全,而且取膜容易,适用于城市水处理测试、地表水分析、工厂工艺用水测试、饮用水分析。
样品体积
根据样品体积选取合适容积的漏斗,可以大大提高工作的效率。如果漏斗过小而样品量过大,就得一边注入一边等待。另外,漏斗上刻度清晰也很重要,可以帮你简单判断样品的量。据介绍,MicroFunnel一次性过滤漏斗有100ml和300ml两种规格,可以应用较大量的样品。而47mm磁性过滤漏斗有150ml、300 ml、和500 ml可选,能够适应多种不同的需要。
灭菌要求
一般可以反复使用的漏斗,都能经受得住高压灭菌。不过有些操作者习惯在无菌操作前,用火焰给器具消下毒。如果你有这样的习惯,那么不锈钢漏斗或玻璃漏斗将是更适合你的选择。